技能训练2 组培常用仪器设备的使用.doc

恒温水浴锅技能训练2组培常用仪器设备的使用

恒温水浴锅

技能目标

1．清楚组织培养常用仪器设备的原理

2．熟练使用组织培养常用的仪器设备

训练前准备

组织培养实验室；高压灭菌锅、超净工作台等常用仪器设备及相关试剂、用品等

。

1.精密pH计(PHS-3C型)的使用

图1-12精密pH计(PHS-3C型)(1)构造与工作原理精密pH

图1-12精密pH计(PHS-3C型)

(2)操作步骤

①开机前准备

A.电极梗旋入电极插座，调节电极夹到适当位置；

B.复合电极夹在电极夹上，拉下电极前端的电极套；

C.用蒸水清洗电极，清洗后用滤纸吸干。

②开机

A.电源线插入电源插座；

B.按下电源开关，电源接通后，预热30min后进行标定。

③标定仪器使用前先要标定。如果仪器连续使用则每天要标定1次。

A.在测量电极插座处拨去短路插座；

B.在测量电极插座处插上复合电极；

C.把选择开关旋钮调到pH档；

D.调节温度补偿旋钮，使旋钮白线对准溶液温度值；

E.把斜率调节旋钮顺时针旋到底（即调到100%位置）；

F.把清洗过的电极插入pH6.86的缓冲溶液中；

G.调节定位调节旋，使仪器显示读数与该缓冲溶液当时温定下降时的pH值相一致（如用混合磷酸定位温度为10℃时，pH6.92）；

H.用蒸馏水清洗过的电极，再插入pH4.00（或pH9.18）的标准溶液中，调节斜率旋钮使仪器显示读数与该缓冲溶液中当时温度下的PH值一致；

I.重复（6）～（8）直至不用再调节定位或斜率两个调节旋钮为止，标定完成。

④测量pH值经标定过的仪器，即可用来测定被测溶液。被测溶液与标定溶液温度相同与否，其测量步骤也有所不同。

A.被测溶液与定位溶液温度相同时，测量步骤如下：

用蒸馏水清洗电极头部，再用被测溶液清洗1次；

把电极浸入被测溶液中，用玻璃棒搅拌溶液使溶液均匀，在显示屏上读出溶液的pH值。

B.被测溶液和定位溶液温度不相同时，在电极清洗后，要用温度计测出被测溶液的温度值，调节“温度”调节旋钮，使白线对准被测溶液的温度值，然后再实际测定溶液的pH值。

图1-13超净工作台2.超净工作台的使用

图1-13超净工作台

(1)构造与工作原理超净工作台有水平风和垂直风、单人和双人之分，主要由三相电机、鼓风机、初过滤器和超过滤器、挡板、工作台面等几部分构成（图2-10）。通过电机带动，鼓风机将空气通过特制的微孔泡沫塑料片层叠合组成的“超级滤清器”后吹送出来，形成连续不断的无尘无菌的超净空气层流(除去了大于0.3μm的尘埃、真菌和幼苗孢子等)，在工作台面制造无菌区，这足以防止附近空气可能袭扰而引起的污染，20～30m/min的风速也不会妨碍采用酒精灯对器械的灼烧灭菌。

(2)操作步骤①接通电源；②打开台内紫外灯杀菌30min；③30min后关紫外灯，打开风机20min；④打开照明灯，准备接种。

(3)超净工作台使用时的注意事项

①新安装的或长期未使用的超净工作台，使用前必须对超净工作台和周围环境使用超净真空吸尘器或不产生纤维的工具，认真进行清洁工作。

②工作台面上不要存放不必要的物品，以保持工作区内的洁净气流，不受干扰。

③禁止在工作台面上记录，工作时应须尽量避免作明显扰乱气流的动作。

④定期(一般为2个月)用热球式风速仪测量工作区风速，如发现不符合技术要求，则可调大风机的供电电压。

⑤在工作台右侧有5A外接电源插座，可供使用。

图1-14便携式压力灭菌锅3.便携式压力灭菌锅的使用

图1-14便携式压力灭菌锅

(1)构造与工作原理便携式压力灭菌器由锅体、内锅、电热管、搁帘、锅盖、压力表、橡胶密封垫、放气阀、安全阀等构成(图2-11)。其工作原理是利用所产生的高压湿热水蒸汽(温度为121～123℃，压力为0.10～0.15Mpa)

(2)操作步骤

①加水装锅打开锅盖，加入清水，至超过锅底搁帘1cm左右，然后放上内锅，装入灭菌物物品，盖上锅盖，对角线拧紧螺栓。

②通电升压，排冷空气接通电源，使灭菌器开始工作。当压力0.05MPa时，打开放气阀，排放冷气，待指针回零后(根据具体情况，可反复2～3次排放冷气)，关闭放气阀，使灭菌器升压。

③保压当压力达到0.10MPa时，开始计时，使锅内蒸汽压力保持0.10～0.15MPa的范围，维持15～30min的灭菌时间。

④降压排汽：灭菌结束后断开电源，让锅内压力自然下降。当指针归零后打开放汽阀，排放余汽。

⑤出锅冷却：当压力表指针为零时，打开放气阀，手戴隔热手套，开锅取瓶。用周转筐运至接种室或冷却室，待培养基冷却凝固后方可使用。

(3)使用和维护时的注意事项

①装锅时，不要装得太满