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请教：蛋白浓缩方法
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请教各位高手，我想将细胞培养上清中的蛋白浓缩10倍，但要确保最小的蛋白变性与蛋白丢失，应该采用
什么方法比较好？请不吝赐教，谢谢！
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可以用：超虑；盐析；过离子柱等等，看你的试验条件定咯
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蛋白浓缩方法基本有：
丙酮沉淀法；免疫沉淀法；三氯醋酸沉淀法；硫酸铵沉淀法；（低温）有机溶剂沉淀法；聚乙二醇沉淀法；
超滤法；透析法；离子交换层析和冷冻干燥法……
1，丙酮沉淀法；三氯醋酸沉淀法试验要求的仪器简单，但是常常导致蛋白质变性。
2，免疫沉淀法：得有特异性抗体！
3，硫酸铵沉淀法：利用高浓度盐将蛋白质析出（盐析）
选择硫酸按是因为：盐析有效性，pH范围广，溶解度高，溶液散热少，经济！
4，（低温）有机溶剂沉淀法：强调低温（0-4度以下）是因为10度时蛋白会在有机溶剂中变性，可用乙
醇，丙酮……注意：Mg2+离子，pH值
5，聚乙二醇沉淀法：使用PEG时旨在个别情况下才会是蛋白质稍有变性！他溶解是散热低，形成沉淀的平
衡时间短，通常达到30%时蛋白质就会达到最大量的沉淀！
6，超滤法：主要针对小体积蛋白质溶液（几ml）此法更不易引起变性！不过得有浓缩器，不是哪个实验
室都有的！
7，透析法：主要用于更换蛋白质的缓冲液！的有透析袋！不需要特殊的仪器！
8，离子交换层析：可用阴离子交换树脂进行浓缩！
9，冷冻干燥法：在冷冻状态下让扬品种的液体升华
具体你的实验应该是做一种分泌蛋白吧？
浓缩后要干什么，需要活性蛋白么？
实验室设备如何，导师经费如何？
这些都要考虑！！
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我用的是硫酸铵沉淀法，物廉价美。
用4度饱和硫酸铵等体积加入收集的上清中，以30000g的速度离心30分钟，弃上清，加入你所需体积的
缓冲液体，在震荡器上使沉淀溶解，再在10000g下离心10分钟取上清分装保存于-80度即可
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关于蛋白浓缩，我认为最好的方法是真空冷冻干燥法，此法简便，蛋白质几乎无变性。
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lhydywrote:
请教各位高手，我想将细胞培养上清中的蛋白浓缩10倍，但要确保最小的蛋白变性与蛋白丢失，应该采用
什么方法比较好？请不吝赐教，谢谢！
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不知你何种用途，最简单的浓缩我们常用蔗糖或PEG包埋。
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一个简便的方法你可以试试：找一透析袋，底部扎紧，袋口扎一去底的塑料或玻璃试管，将待浓缩的液体
从管口灌入透析袋中，将整个装置挂在冰箱中，或者用电风扇吹，液体干后可再继续加入，直至样品浓缩
至所需体积。如必要，可事先将待浓缩液用蒸馏水或去离子水透析以去盐分，然后再按上述方法浓缩，这
样可以避免浓缩
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