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人感染H7N9禽流感采样及防护要求
牟定县疾病预防控制中心罗林人感染H7N9禽流感H7N9型禽流感是一种新型禽流感,于2013年3月底在上海和安徽两地率先发现。H7N9型禽流感是全球首次发现的新亚型流感病毒,尚未纳入我国法定报告传染病监测报告系统,并且至2013年4月初尚未有疫苗推出。被该病毒感染均在早期出现发热等症状,至2013年4月尚未证实此类病毒是否具有人传染人的特性。截至2013年4月10日,全国共报告31例确诊病例,其中死亡9人,1人康复出院。病例分布于上海(13例,死亡5例)、江苏(10例,1例死亡)、安徽(2例,死亡1例)、浙江(6例,死亡2例)4省市的19个地市级区域。人感染H7N9禽流感采样标本采集、转送和检测标本采集:采集对象:人感染H7N9禽流感医学观察病例、疑似病例、临床诊断病例及需要进一步研究的确诊病例;其它需要进行H7N9禽流感诊断和排除者;需要采集的环境标本。人感染H7N9禽流感采样●采样要求:①从事人感染H7N9禽流感采样技术人员必须经过相应的生物安全培训和操作技能;②住院病例的标本由所在医院的医护人员采集;③密切接触者标本由当地疾病预防控制中心负责采集;④其它人员的标本由疾病预防控制中心负责采集。●采样前的准备:①器械及耗材剪刀,镊子,采血包,病毒采样包、试管架、冷藏包、采样记录、标记笔等。②防护备齐三级防护包及采样前穿好防护服。结合流调,确定采样的时间地点、对象及范围。结合临床,采集样品(标本)的种类及数量。样品采集要认真细致,规范操作。把握重点,保证质量,提高检出率。加强无菌观念,防止样品污染。做好个人防护,防止自身感染。采样原则上呼吸道样本(包括咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物、咽漱液和鼻洗液);样本采集:人感染H7N9禽流感采样血清标本等。下呼吸道样本(如气管吸取物、肺洗液、肺组织标本);01咽拭子采集:用2根聚丙烯纤维头的塑料杆拭子同时擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁,将拭子头浸入含3ml采样液的管中,尾部弃去,旋紧管盖。鼻拭子:将1根聚丙烯纤维头的塑料杆拭子轻轻插入鼻道内鼻腭处,停留片刻后缓慢转动退出。取另一根聚丙烯纤维头的塑料杆拭子以同样的方法采集另一侧鼻孔。采集方法:02人感染H7N9禽流感采样鼻咽抽取物或呼吸道抽取物:用与负压泵相连的收集器从鼻咽部抽取粘液或从气管抽取呼吸道分泌物。将收集器头部插入鼻腔或气管,接通负压,旋转收集器头部并缓慢退出,收集抽取的粘液,并用3ml采样液冲洗收集器1次(亦可用小孩导尿管接在50ml注射器上来替代收集器)。咽漱液:用10ml不含抗菌素的采样液漱口。漱口时让患者头部微后仰,发“噢”声,让洗液在咽部转动。12上述两根拭子浸入同一含3ml采样液的管中,尾部弃去,旋紧管盖。人感染H7N9禽流感采样然后将咽漱液收集于50ml无菌的螺口塑料管中。无条件的可用平皿或烧杯收集咽漱液并转入10ml螺口采样管中。01深咳痰液:要求病人深咳后,将咳出的痰液收集于50ml含3ml采样液的螺口塑料管中。02人感染H7N9禽流感采样呼吸道灌洗液:将收集器头部从鼻孔或气管插口处插入气管(约30cm深处),注入5ml生理盐水,接通负压,旋转收集器头部并缓慢退出。收集抽取的粘液,并用采样液涮洗收集器1次(亦可用小孩导尿管接在50ml注射器上来替代收集)。12肺组织活检标本:在超声或X线定位下,经皮穿刺取肺组织活检标本,置于含3ml采样液的塑料螺口管中。3胸水:在B超定位下进行胸腔穿刺,抽取胸水5ml,置于无菌的塑料螺口管中。人感染H7N9禽流感采样尸检标本:每一采集部位分别使用不同消毒器械,以防交叉污染;每种组织应多部位取材,各部位应取20~50g,淋巴结取2个。粪便标本:采集5~10g粪便置于含5~10ml采样液无菌螺口管中,严格密封。血清标本:用真空负压采血管采集血液标本5ml,室温静置30分钟,1500~2000rpm离心10分钟,收集血清于2ml无菌螺口塑料管中。注:常用的采样液配方为:pH7.4~7.6的Hanks氏液或MEM/DMEM液。在采样液中需加入抗菌素,可用青霉素(终浓度为100U/ml)、庆大霉素(终浓度为1mg/ml)和抗真菌药物(终浓度为2μg/ml)。人感染H7N9禽流感采样样本采集时应当尽量采集病例发病早期的呼吸道标本(尤其是下呼吸道标本)和发病7天内急性期血清以及间隔2-4周的恢复期血清;如病人死亡,应当尽可能说服家属同意尸检,及时进行尸体解剖,采集组织(如肺组织、气管、支气管组织)标本;为避免标本反复冻融
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