大肠杆菌的培养和分离.pptVIP

大肠杆菌的培养和分离微生物简单介绍放线菌单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体（种群）菌落是鉴定菌种的重要依据大肠杆菌结构异养型，兼性厌氧型，革兰氏阴性(红色)(G-)应用问题1：用什么培养大肠杆菌？培养基。按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。凝固剂琼脂扩大培养，工业生产分离纯化，鉴定菌种，计数，保藏选择培养基鉴定培养基天然培养基合成培养基成分作用主要来源碳源主要作能源物质无机碳(CO2)或有机碳(糖类)氮源合成含N类化合物N2，NH3，铵，硝酸盐尿素，牛肉膏，蛋白胨无机盐调节渗透压等水生长因子调节促生长维生素，Aa，碱基等细菌中性偏碱，霉菌中性偏酸。如鉴定分解尿素的细菌，在培养基中添加酚红，产生红色反应。LB液体培养基与LB固体培养基。分离自养型微生物不加含碳有机物的无碳培养基:04分离固氮菌不加氮源的无氮培养基:03分离金黄色葡萄球菌加入高浓度食盐的培养基:02分离酵母菌、霉菌等真菌加入青霉素的培养基:01问题2：在培养过程中如何进行维持无菌状态？01消毒VS灭菌添加标题02芽孢为细菌的休眠体，对不良环境有很强耐受性添加标题03较为温和的方法，如酒精添加标题04强烈，完全无菌添加标题05灭菌消毒技术是微生物有关工作中最普通也是最重要的技术。添加标题灭菌消毒技术大汇总1、高压蒸汽灭菌法1kg/cm2、121℃下维持15min.0.5kg/cm2、90℃下维持30min.防止温度过高，葡萄糖分解碳化。2、灼烧灭菌法接种环、接种针玻璃刮刀3、干热灭菌法其他三角瓶用封口膜、超净台操作（含紫外灯、过滤风）在接种时要速度快G6玻璃纱漏斗过滤法160-170℃下加热1-2h。3、如何分离大肠杆菌划线分离法（平板划线分离法）①培养皿倒置②划线的末端出现不连续的单菌落涂布分离法玻璃刮刀放在酒精溶液中待用取出时要经过灼烧一般要稀释菌液进行培养稀释10-5—10-7倍，取0.1ml不同浓度的稀释液（稀释）4、大肠杆菌的培养和分离的过程溶解计算称量调pH分装加塞，包扎灭菌二倒平板、制斜面三大肠杆菌的培养四大肠杆菌的分离划线分离法（或涂布分离法）使所需细菌大量繁殖获得单菌落，纯化菌株五斜面接种培养目的菌株的纯培养和菌种保存一配制LB培养基,并灭菌菌种管接种环（针）接种三角瓶（液体培养基）接种在固体培养基中