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课程:现代分离技术实验报告
班级:应化134班
学号:2013015054
姓名:聂晓迪
实验名称:金银花中绿原酸的提取与分离
关键字:金银花绿原酸薄层色谱索氏提取器柱层析
摘要:通过索氏提取器从金银花中提取绿原酸,利用减压
浓缩、柱层析、紫外检测技术,薄层色谱对绿原酸进行分析,
检测。
一、实验背景
金银花是人医临床常用的有代表性的清热解毒药,具有
抗菌、消炎、解热、保肝、止血、免疫调节、降血脂、兴奋
中枢等多方面的药理学作用,能改善放、化疗所致的白细胞
降低,有“中药中的青霉素”的美誉。另外,金银花还被广
泛地应用于保健品、化妆品、卷烟、食品等行业。金银花抗
菌的有效成分主要是绿原酸和异绿原酸,并且常以绿原酸含
量的高低来评价金银花质量的优劣。采用超声波法和索氏法
均能较好地从金银花中提取绿原酸。本实验中采用索氏提取
法。
二、实验目的
(1)掌握渗滤、回流提取、索氏提取等天然生物活性成分的
一般提取方法;
(2)掌握制作薄板及薄板层析、色谱分离、重结晶等天然生
物活性成分的一般分离与纯化方法;
(3)熟悉天然生物活性成分的一般定性检测方法。
(4)培养动手能力和分析及解决实际问题等综合能力。
三、实验原理
绿原酸是一种含羟基和邻二酚基的有机酸,极性与乙醇相
近。因此根据“相似相溶”原理,含有乙醇的溶剂更容易有
效的提取绿原酸。由于乙醇溶剂的扩散‘渗透作用逐渐通过
金银花细胞壁渗入到细胞内,溶解了绿原酸,而造成细胞内
外绿原酸的浓度差,于是细胞内的绿原酸溶液不断向外扩
散,乙醇溶剂不断进入金银花中,如此不断往返,就可以把
绿原酸近于完全溶出或大部分溶出。
四、实验主要用品
(1)材料:金银花(为金银花花蕾和开放花的混合样品,经
烘房烘干后,备用。)
(2)试剂:本实验所用有机、无机试剂均为分析纯。
薄层层析硅胶:GF254和硅胶G,化学纯
柱层析硅胶:硅胶G(粒度100-200目)
(3)主要仪器:旋转蒸发仪、电热恒温鼓风干燥箱、三用紫
外仪、电子分析天平、高效液相色谱仪。
五、绿原酸物理性质
名称分子式分子量性状熔点溶解度
绿原酸CHO345.30半水化合物为208℃水中4%,在热水中溶解度更
16189
针状晶大,易溶于乙醇、丙酮和甲醇
(110℃变为等极性溶剂,难溶于氯仿、苯、
无水化合物)乙醚等亲脂性有机溶剂
结构式:
六、实验装置图
图一索氏提取器图二旋转蒸发仪
薄层色谱
七、实验步骤与现象
1.索氏提取器对绿原酸的提取:
(1)金银花粗粉称取50g,用滤纸做成筒状嵌入提取器中,
用75%乙醇采用索氏提取器回流处理4h(9点-13点10分),
发生虹吸36次。提取器内液体颜色逐渐由深墨绿色变为浅
黄绿色,烧瓶内液体颜色越来越深,逐渐变为墨绿色。
(2)取其提取液在旋转蒸发仪中进行减压浓缩,温度设置
为45℃,浓缩得浸膏,呈褐绿色。
2.TLC板的制备与活化:
(1)在干净的研钵内加入约6g硅胶GF254,在轻轻研
磨的同时缓慢加入15ml0.5%羧甲基纤维素钠水溶液。继续
研磨约10min,当体系粘稠度适宜时,即可进行铺板。
(2)用药匙将适量糊状物均匀摊在干净干燥的载玻片上,
然后用手拿住薄板的
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