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梅花鹿体内胚胎生产与移植技术规程

1范围

本文件确立了梅花鹿体内胚胎生产与移植技术的流程，规定了供体的选择与饲养管理、供体的同期发情超数排卵与人工授精、手术法胚胎采集与胚胎质量鉴定、胚胎冷冻保存与解冻、胚胎移植与妊娠检查技术操作的要求，描述了过程记录表、照片、影像证实的方法。

本文件适用于梅花鹿体内胚胎生产与移植技术操作。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T5458GB/T6682GB/T6935

液氮生物容器

分析实验室用水规格和试验方法中国梅花鹿种鹿

GB/T25881—2010牛胚胎

NY/T1674—2008牛羊胚胎质量检测技术规程

NY/T1900—2010畜禽细胞与胚胎冷冻保种技术规范DB21/T1835—2020梅花鹿饲养管理技术规程

DB22/T2611—2017梅花鹿冷冻精液

DB21/T2749—2017梅花鹿冷冻精液人工授精技术规程

3术语、定义和缩略语

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

供体donor

用于生产胚胎的母鹿个体。3.2

受体recipient

用于移植胚胎的母鹿个体。3.3

阴道栓vaginalsuppository

一种内含孕酮、用特制放置器将其放入母鹿阴道的同期发情装置。

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3.4

拇指管goblet

一端封闭，另一端开口的圆柱形贮存冷冻胚胎细管的器材。在液氮中（—196℃)不变形、不爆裂。

3.5缩略语

下列缩略语适用于本文件。

CIDR：孕酮阴道栓（controlledinternaldrugreleasing）FSH:促卵泡素（follicle-stimulatinghormone）

PMSG:孕马血清促性腺激素（pregnantmareserumgonadotropin）PG:前列腺素（prostaglandin）

LHRH：促黄体素释放激素（luteinizinghormonereleasinghormone）PBS：磷酸盐缓冲液（phosphatebufferedsaline）

BSA：牛血清白蛋白（bovineserumalbumin）

4技术流程

梅花鹿体内胚胎生产与移植技术流程包括供体的选择与饲养管理、供体的同期发情超数排卵与人工授精、手术法胚胎采集与胚胎质量鉴定、胚胎冷冻保存与解冻、胚胎移植与妊娠检查。梅花鹿体内胚胎生产与移植技术流程见图1。

图1梅花鹿体内胚胎生产与移植技术流程图

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5供体的选择与饲养管理

5.1供体的选择

供体应满足以下条件：

a)品种优良，生产性能优秀，经济价值大，综合评定等级一级以上；

b)三代系谱完整，繁殖机能正常，遗传性能稳定；

c)3岁～5岁经产母鹿，体质健康，营养状况良好

5.2供体的饲养管理

供体的饲养管理应满足以下条件：

a）单圈饲养，杜绝人员参观，以免引起应激；

b）超数排卵前4周～5周应进行短期优饲，每只每天补饲胡罗卜0.25kg，精料饲喂量及配方遵守DB21/T1835—2020中5.5.3的规定；

c）同期发情处理后，肌肉注射维生素A、维生素D、维生素E，剂量按照产品说明；

d）超数排卵前4周，避免注射疫苗。

6供体的同期发情、超数排卵与人工授精

6.1器材和药品

6.1.1器材

同期发情、超数排卵与人工授精所需主要器材应符合附录A中A.1的相关规定。

6.1.2药品

同期发情、超数排卵与人工授精所需主要药品应符合附录A中A.2的相关规定。

6.2同期发情与超数排卵

在发情周期的任意一天埋植CIDR，埋栓当天记为第0天，在埋栓后第11天开始肌肉注射FSH（同时换栓），每天早、晚各1次，间隔12h，4d8次，剂量递减，总剂量10.00mL。在第6次注射FSH时撤栓，同时肌肉注射PG1.50mL，撤栓后30h～36h肌肉注射LHRH-A325μg。FSH4d注射程序见表1。

表1FHS4d注射程序

时间

剂量

第1天

第2天

第3天

第4天

6:30

FSH2.60mL

FSH1.80mL

FSH1.40mL

FSH1.00mL

18:30

FSH2.20mL

FSH1.80mL

FSH1.40mL

FSH0.70mL

注：每瓶FSH（500IU）用10mL