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目录
摘要I
AbstractIII
中英文缩略词表VI
第一章前言1
1.1先兆子痫（Preeclampsia,PE）1
1.1.1先兆子痫的定义1
1.1.2先兆子痫的分类1
1.1.3先兆子痫的发病机制研究进展2
1.1.4先兆子痫的预测研究进展4
1.2蜕膜化（Decidualization）5
1.2.1蜕膜化的形态学特征5
1.2.2蜕膜化的作用6
1.2.3蜕膜化的分子变化7
1.2.4蜕膜细胞的多核化7
1.3NOP2/SunRNAmethyltransferase5(NSUN5)8
1.4研究内容及研究意义9
1.4.1研究内容9
1.4.2研究意义10
第二章重度先兆子痫患者与正常妊娠孕妇的临床数据11
2.1引言11
2.2实验材料11
2.2.1研究对象与分组11
2.2.2标本采集11
2.3实验结果11
2.3.1研究人群的临床基线特征11
2.3.2NSUN5及NSUN5SNP与PE显著相关12
2.4讨论14
2.5本章小结14
第三章Nsun5敲除对小鼠的影响15
3.1引言15
3.2实验材料与方法15
3.2.1实验材料15
3.2.2CRISPR/Cas9基因编辑15
3.2.3苏木素和伊红（H＆E）染色分析16
3.2.4PAS染色分析17
3.2.5天狼猩红染色分析18
3.2.6透射电镜分析18
3.2.7免疫组织化学分析20
3.2.8RNA提取及qPCR分析20
3.2.9组织蛋白提取以及WesternBlot检测21
3.3实验结果24
3.3.1Nsun5基因敲除导致小鼠存活率显著降低24
3.3.2Nsun5-/-小鼠表现出多器官受损26
3.3.3Nsun5-/-小鼠肾脏致命损伤29
3.3.4Nsun5缺失诱导DNA损伤和细胞凋亡的积累31
3.4讨论33
3.5本章小结35
第四章NSUN5R295C点突变对小鼠妊娠的影响36
4.1引言36
4.2实验材料与方法37
4.2.1实验材料37
4.2.2构建NSUN5R295C点突变小鼠38
4.2.3基因型鉴定38
4.2.4小鼠血压的测量与统计40
4.2.5蛋白尿检测40
4.2.6不同时期小鼠胚胎的获取与拍照42
4.2.7苏木素和伊红(H＆E)染色分析42
4.2.8PAS染色分析42
4.2.9透射电镜分析42
4.2.10免疫荧光染色分析42
4.2.11小鼠人工诱导蜕膜化42
4.2.12胎盘面积统计及数据统计分析43
4.2.13mRNA转录组测序分析44
4.2.14免疫组织化学分析45
4.2.15RNA提取及qPCR分析45
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