外源DNA残留量测定(荧光定量PCR法)标准操作规程SOP.pdf

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外源性DNA残留量测定法(荧光定量PCR法)

标准操作规程

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目录

1.目的.1

2.范围.1

3.职责.1

4.依据.1

5.定义.1

6.内容.1

6.1.原理1

6.2.实验材料1

6.3.操作步骤3

6.4.结果计算6

6.5.判定标准7

6.6.注意事项7

7.相关文件.7

8.附件.7

9.变更历史.7

外源性DNA残留量测定法(荧光定量PCR法)标准操作规程

1.目的

1.1.规范外源性DNA残留量测定法(荧光定量PCR法)的操作过程。

2.范围

2.1.本规程适用于采用荧光定量PCR法对CHO细胞表达产品进行外源性DNA残留

量的测定。

3.职责

3.1.方法学研究员负责严格执行本规程规定;

3.2.质量研究室负责人负责本规程的培训并监督本规程的执行。

4.依据

4.1.DNA残留量检测样品处理试剂盒(PrepSEQTMResidualDNASamplePreparation

kit,AppliedBiosysterms)使用说明书。

5.定义

5.1.LTR:longtandemrepeat,长串联重复序列

5.2.PCR:PolymeraseChainReaction,聚合酶链式反应

5.3.Ct:阈值循环,即荧光信号强度超过设置的阈值强度时所经历的循环数

6.内容

6.1.原理

CHO工程细胞所表达的蛋白质产品,其外源性DNA残留量的测定采用荧光定量

PCR法。该方法是以荧光定量PCR仪为设备平台基础,选择CHO细胞中含量较丰富的

一段LTR(longtandemrepeat,长串联重

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