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普伐他汀对腹主动脉瘤形成的影响和机制研究

1研究背景腹主动脉瘤(abdominalaorticaneurysm,AAA)是一种常见的具

有潜在致死危险的慢性血管退行性疾病,一旦破裂,死亡率超过85%。在美国,AAA

在65岁以上的男性老年人群中发病率达到6%-9%,而每年因AAA破裂导致死亡的

人数占总死亡人数的0.8%。

目前由于对AAA缺乏有效的内科治疗手段,临床上一旦发现AAA,即采用危险

性很高的手术治疗切除AAA,以预防瘤体的破裂而致命。由于AAA具备危害性大、

内科治疗效果差及外科手术风险高等临床特征,因此从AAA的发病机制着手,找

到致AAA的危险因素,进而预防AAA的形成和破裂,具有重要意义。

机制上,AAA是由于动脉中层弹力蛋白破坏、血管平滑肌细胞(vascular

smoothmusclecell,VSMC)凋亡、代偿性胶原蛋白沉积等而引起腹主动脉管壁的

永久性扩张。血管壁的炎症反应和基质降解是引起AAA的关键因素。

例如,在动物实验研究中,血管紧张素Ⅱ(AngiotensinⅡ,AngⅡ)能上调氧

化应激,从而启动基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinases,MMPs)的基因转

录,最终导致AAA形成。他汀类药物(3-羟基-3-甲基戊二酰单酰辅酶A还原酶抑

制剂)除了具有强效降脂作用外,还能通过抑制VSMC增殖、阻止内皮细胞黏附、

改善内皮功能以阻止动脉粥样硬化的形成。

他汀类药物也可引起不良作用,例如胰岛素抵抗、肝酶升高、骨骼肌毒性和

心肌萎缩。然而,现有的研究结果中他汀类药物对AAA的作用尚存在分歧。

例如,普伐他汀在低剂量(5mg/kg/day)时可以抑制脑动脉瘤的形成,而在高

剂量(25mg/kg/day和50mg/kg/day)时则促进雌激素敲除大鼠脑动脉瘤的形成。

与之不同的是,辛伐他汀抑制了AngⅡ所诱导的载脂蛋白E基因敲除(Apoe-/-)

小鼠AAA的形成;瑞舒伐他汀和阿托伐他汀对AAA无影响。

AMP活化的蛋白激酶(AMP-activatedproteinkinase,AMPK)在真核生物能

量稳态中起重要作用,它含有α、β、γ三种亚单位,其中αα是催化亚单位,β

和γ是调节亚单位。前期研究发现吸烟的主要活性成分尼古丁可激活AMPK,最终

导致了Apoe-/-小鼠AAA形成;普伐他汀在骨骼肌细胞和内皮细胞能激活AMPK,

提示普伐他汀可能促进AAA形成。

激活蛋白2α(Activatorprotein2α,AP-2α)是AP-2转录因子家族成员

之一。研究发现敲除AP-2转录因子的小鼠由于异常发育在出生之后就会死亡,

提示AP-2转录因子对哺乳动物是必不可少的。

Park等人研究认为神经生长因子能活化转录因子AP-2α依赖的MMP-2的基

因转录,引起内皮细胞侵润,最终促进血管形成。前期研究发现AMPKα2作为AP-2

α转录因子的上游激酶,能磷酸化转录因子AP-2α的第219个丝氨酸残基(AP-2

αproteinatserine219,AP-2α-S219);阿司匹林可激活AMPK,从而增加了

AP-2α转录因子的表达,最终发挥稳定易损性动脉粥样斑块的作用。

综上所述,现有的研究结果中他汀类药物对AAA的作用仍然存在分歧,且有

关普伐他汀在AngⅡ所诱导的Apoe-/-小鼠AAA中的作用尚无研究报道。因此,

应用AngⅡ诱导的Apoe-/-小鼠的AAA模型,探讨普伐他汀对AAA的影响及机制研

究。

2目的(1)观察普伐他汀在持续灌注AngⅡ所诱导的Apoe-/-小鼠AAA形成

中的作用;(2)探讨普伐他汀促进AAA形成的分子机制。3方法3.1构建AMPK或

者AP-2α慢病毒载体根据三个不同序列的AMPKshRNA或者AP-2αshRNA,转染

小鼠VSMCs验证AMPK或者转录因子AP-2α干扰效果,筛选干扰效果最优的shRNA

序列构建慢病毒载体。

3.2动物模型的建立体内动物实验分为四部分。第一部分:观察普伐他汀对

AngⅡ所诱导的Apoe