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反相色谱法测定尼泊金甲酯(防腐剂).pdf

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反相色谱法测定尼泊金甲酯(防腐剂)

一、实验目的

1、了解反相色谱法测定试样中尼泊金甲酯的含量的实验原理和方法;

2、掌握外标法进行色谱定性分析的方法和原理。

二、实验原理

1、尼泊金甲酯的物理、化学性质

又称对羟基苯甲酸甲酯(结构式如右图),又叫尼泊金OO

甲酯,白色结晶粉末或无色结晶,易溶于醇,醚和丙酮,极

微溶于水,沸点270-280℃。主要用作有机合成、食品、化妆

品、医药的杀菌防腐剂,也用作于饲料防腐剂。

OH

2、外标法原理

先测量一系列尼泊金甲酯标准溶液的色谱峰,得到峰面积。然后用峰面积对溶度

作图,得一标准曲线。然后在相同实验条件下测定样品中尼泊金甲酯的峰面积,由

标准曲线上找出该峰面积下所对应的溶度,从而算出试样中尼泊金甲酯的含量。

三、仪器与试剂:

色谱柱:C18(十八烷基硅烷键合硅胶固定相为填充剂),柱长75mm,柱径

4.6mm;10mg/ml的尼泊金甲酯标样(储备液)

流动相:甲醇:水=70:30混合溶剂,流动相流速为1mL/min,检测器:紫外检测

器,254nm

四、实验步骤:

1、标准溶液的配制:用流动相为溶剂,标样储备液为原液配制浓度为

0.02mg/mL、0.04mg/mL、0.06mg/mL、0.08mg/mL、0.10mg/mL一系列标准溶液。

2.标准曲线的制作:待仪器稳定后,依次进样20μL已知浓度的标准溶液,记录

色谱图(1-5)及保留时间t;

R

3.样品分析:注入20μL未知溶液,记录色谱图(6)及各组分保留时间t;

R

五、数据处理:

根据色谱图1-5中峰面积,绘出峰面积对浓度的标准曲线;

根据步骤2中标样的保留时间确定未知样品中尼泊金甲酯的位置;

根据色谱图(6)确定尼泊金甲酯的峰面积,然后在标准曲线上查出被测组分的浓

度。

表一:一系列尼泊金甲酯标准溶液保留时间及其峰面积:

进样量浓度t/min峰面积

R

mg/ml

0.021.2232838968

0.041.2254219146

0.061.2527403238

0.081.2479370584

0.101.251

s

/

v

u

吸8000000

6000000

4000000

2000000

0.020.040.060.08

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