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天行健,君子以自强不息。地势坤,君子以厚德载物。——《周易》
植物组培培养基及其配制
培养基好比土壤,是组织培养中离体材料赖以生存和发展的基地。因
此,在组织培养基的各个环节中,应着重掌握培养基,了解它的组成
和配制方法。
一、组成培养基的五类成分
目前,大多数培养基的成分是由无机营养物、碳源、维生素、生
长调节物质和有机附加物等五类物质组成的。
1.无机营养物
无机营养物主要由大量元素和微量元素两部分组成,大量元素中,
氮源通常有硝态氮或铵态氮,但在培养基中用硝态氮的较多,也有将
硝态氮和铵态氮混合使用的。磷和硫则常用磷酸盐和硫酸盐来提供。
钾是培养基中主要的阳离子,在近代的培养基中,其数量有逐渐提高
的趋势。而钙、钠、镁的需要则较少。培养基所需的钠和氯化物,由
钙盐、磷酸盐或微量营养物提供。微量元素包括碘、锰、锌、钼、铜、
钴和铁。培养基中的铁离子,大多以螯合铁的形式存在,即FeSO4
与Na2—EDTA(螯合剂)的混合。
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天行健,君子以自强不息。地势坤,君子以厚德载物。——《周易》
2.碳源
培养的植物组织或细胞,它们的光合作用较弱。因此,需要在培
养基中附加一些碳水化合物以供需要。培养基中的碳水化合物通常是
蔗糖。蔗糖除作为培养基内的碳源和能源外,对维持培养基的渗透压
也起重要作用。
3.维生素
在培养基中加入维生素,常有利于外植体的发育。培养基中的维
生素属于B族维生素,其中效果最佳的有维生素B1、维生素B6、生
物素、泛酸钙和肌醇等。
4.有机附加物
包括人工合成或天然的有机附加物。最常用的有酪朊水解物、酵
母提取物、椰子汁及各种氨基酸等。另外,琼脂也是最常用的有机附
加物,它主要是作为培养基的支持物,使培养基呈固体状态,以利于
各种外植体的培养。
5.生长调节物质
常用的生长调节物质大致包括以下三类:
(1)植物生长素类。如吲哚乙酸(IAA)、萘乙酸(NAA)、2,4-二氯苯
氧乙酸(2,4-D)。
(2)细胞分裂素。如玉米素(Zt)、6-苄基嘌呤(6-BA或BAP)和激动素
(Kt)。
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天行健,君子以自强不息。地势坤,君子以厚德载物。——《周易》
(3)赤霉素。组织培养中使用的赤霉素只有一种,即赤霉酸(GA3)。
二、常用培养基配方及其特点
1.常用培养基配方
组织培养是否成功,在很大程度上取决于对培养基的选择。不同
培养基有不同特点,适合于不同的植物种类和接种材料。开展组织培
养活动时,应对各种培养基进行了解和分析,以便能从中选择使用。
下面介绍组织培养几种常用培养基的配方见表9-1。
培养基中的激素种类和数量,随着不同培养阶段和不同材料而有
变化,因此各配方中均不列入。
2.几种常用培养基的特点
(1)MS培养基。MS培养基是目前普遍使用的培养基。它有较高的无
机盐浓度,对保证组织生长所需的矿质营养和加速愈伤组织的生长十
分有利。由于配方中的离子浓度高,在配制、贮存、消毒等过程中,
即使有些成分略有出入,也不致影响离子间的平衡。MS固体培养基
可用来诱导愈伤组织,或用于胚、茎段、茎尖及花药培养,它的液体
培养基用于细胞悬浮培养时能获得明显成功。这种培养基中的无机养
分的数量
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