氨基糖苷类残留.ppt

关于氨基糖苷类残留AGs的结构和理化性质相似。由于结构中含有多个氨基和羟基，故呈碱性，极性高，易溶于水，能与无机酸或有机酸成盐。其硫酸盐为白色或近白色结晶性粉末，具吸湿性，易溶于水，但在多数有机溶剂中难溶，在甲醇等高极性溶剂中微溶，在疏水性溶剂中几乎不溶。第2页,共18页，星期六，2024年，5月AGs对酸、碱或加热条件相当稳定，但在强酸或强碱性条件下也可发生水解。第3页,共18页，星期六，2024年，5月2．药理学及毒理学AGs主要作用于细菌的核糖体，引起tRNA在翻译mRNA上的密码时出现错误，使合成异常的蛋白质，阻碍易合成蛋白质的释放，从而抑制细菌的生长。AGs属于静止期杀菌剂。主要作用于革兰阴性菌，如大肠杆菌、沙门菌、产气杆菌等。第4页,共18页，星期六，2024年，5月AGs水溶性好，故口服不易被吸收，一般注射给药，吸收迅速而安全。AGs主要经肾排泄，血浆半衰期为2—3h。肾组织浓度较高。肌注后AGs在动物肾脏易于蓄积。第5页,共18页，星期六，2024年，5月AGs的毒副作用主要是耳毒性和肾脏毒性。AGs能选择性地损害第8对脑神经，导致前庭和耳蜗神经损伤，肾毒性主要表现为近端肾曲管损害，出现蛋白尿、血尿、肾功能减退等。第6页,共18页，星期六，2024年，5月测定方法氨基糖苷类抗生素兽药残留的方法有很多,例如,微生物法、酶联免疫法、荧光免疫法、气相色谱法、薄层色谱法。本文就常用的放射免疫法、液相色谱法、液相-质谱联用法作一综述第7页,共18页，星期六，2024年，5月放射免疫法放射免疫法(Charm??Test)是利用一系列用放射性元素标记的抗生素与样品中的抗生素竞争性结合有特殊位点的受体,利用液体闪烁仪计数,通过检测放射性元素标记的抗生素的量,推算出样品中抗生素的含量。第8页,共18页，星期六，2024年，5月我们利用此方法快速筛选了猪肉中的氨基糖苷类抗生素,在低浓度时,荧光计数值与抗生素的浓度呈现良好的线性关系,在高浓度时由于抗原和抗体之间竞争性结合的原因,它们之间不再是线性关系。第9页,共18页，星期六，2024年，5月CharmII作为一种抗原和抗体竞争结合的技术,在低浓度的时候也存在假阳性结果的现象,有学者用292份牛奶作为样本,比较CharmII和高效液相色谱法,同时测定了四环素浓度2ng/ml时的结果,在显著性水准P小于或等于0.05的时候,有48份样本的结果不准确,占样本总数的16.4%。Carlsson认为在低浓度的时候,牛奶中的油脂会干扰抗原和抗体的结合,从而导致假阳性结果的出现。第10页,共18页，星期六，2024年，5月高效液相色谱法高效液相色谱法(HPLC)由于比较容易分析小分子的不易挥发化合物,因此氨基糖苷类抗生素HPLC法的报道很多。从这类化合物的分子结构看,由于它们缺少生色基团,用常规的UV检测和荧光检测比较困难,因此一系列的柱前和柱后衍生检测法相继报道。第11页,共18页，星期六，2024年，5月柱前衍生法高效液相色谱法衍生检测根据衍生反应是在分离前还是分离后,可分为柱前和柱后衍生检测法。柱前衍生法具有不受流动相限制,并且反应不受分离时间控制的特点。第12页,共18页，星期六，2024年，5月邻苯二甲醛(OPA)作为柱前衍生剂应用比较多,AOAC记载了测定Apramycin的方法,流动相为5mmol的醋酸胺溶液+醋酸+乙腈=60+2+40，色谱柱为Nova-PakC18300mm?3.9mm,荧光检测Ex/Em=230/389nm,在组织中的检测达到了23ng/ml[24]。第13页,共18页，星期六，2024年，5月采用醋酸(10%),己烷磺酸钠(5mmol)+乙腈(60+40~50+50梯度淋洗)作为流动相,灵敏度达到了7ng??ml[25]。RTawa则认2-巯基丙酸代替2-巯基乙醇为硫醇试剂更好。第14页,共18页，星期六，2024年，5月FMOC-Cl作为衍生的另一主要试剂,也有很多报道。Dstead研究了多个氨基糖苷抗生素在FMOC-Cl衍生后,用简单的流动相水+乙腈(10+90),3vmHypersilODS200mm?4.6mm的柱子分离,水溶液的检测限10ng/ml[27,28]。第15页,共18页，星期六，2024年，5月第16页,共18页，星期六，2024年，5月第17页,共18页，星期六，2024年，5月*感谢大家观看第18页,共18页，星期六，2024年，5月