主要的动物病原菌.ppt

CAMP试验微生物学诊断21取病死猪肺坏死组织、胸水、鼻及气管渗出物作涂片，显微镜检查是否有革兰阴性两极染色的球杆菌。近年来则采用PCR法，检测荚膜合成相关基因等，可达快速诊断和定型。确诊需取上述病料接种巧克力琼脂或绵羊血琼脂，置5%CO237℃越夜培养。如有溶血小菌落生长，应进一步作CAMP试验，。3第4节革兰氏阴性需氧杆菌伯氏菌属---鼻疽伯氏菌贰布鲁氏菌属---布鲁氏菌壹波氏菌属---支气管败血波氏菌叁胞内菌的基本概念1根据病原菌与宿主细胞的关系，病原菌分为胞外菌和胞内菌两类。2胞外菌是指可以在宿主细胞外的细胞间隙、血液、淋巴液、组织液等体液中生长繁殖的细菌。3胞内菌又分两种，即兼性胞内菌和专性胞内菌。兼性胞内菌是指在宿主体内，主要寄居在细胞内生长繁殖，在体外无活细胞的培养基中亦可生长。专性胞内菌则不论在体内体外，都必须在活细胞内生长繁殖一、布氏杆菌属：布氏杆菌是引起多种动物和人发病的病原。有羊、牛、猪、鼠、绵羊和犬6个种，20个生物型。BA1.形态与染色球杆状，无鞭毛，不形成芽孢。革兰氏阴性。2.培养及生化特性此属细菌专性需氧，但许多菌株，尤其是在初代分离培养时尚需5%-10%CO2。最适生长温度37℃，最适pH为。泛酸钙和内消旋赤藓糖醇可刺激某些菌株生长。大多数菌株在初次培养时生长缓慢，在48h内罕见形成菌落，常需5-10d甚至20-30d，但实验室长期传代保存的菌株，培养48-72h即可生长良好。普通培养基上生长缓慢；在含有3~5%的甘油或血液、血清、葡萄糖的培养基中生长更好；菌落特点甘油琼脂：细小、光滑、圆形、湿润、粘稠的灰白色渐至灰黄色菌落血琼脂：不溶血马铃薯培养基：蜂蜜状粘稠菌苔，颜色由淡黄色→淡褐色→深褐色；对鉴定有价值孔雀绿酸性复红培养基上，形成淡绿色菌落麦康凯上不能生长01040203在液体培养基中呈轻微浑浊生长，无菌膜。但培养日久，可形成菌环，有时形成厚的菌膜；在固体培养基上，菌落可以分为光滑（S）型菌落粗糙（R）型菌落粘胶状的粘液（M）型菌落3致病性和毒力因子将本属分为该属现包括6个种20个生物型，01马尔他布氏杆菌（Br.melitensis）生物型1~3、02流产布氏杆菌（Br.abortus）生物型1~903猪布氏杆菌（Br.suis）生物型1~504绵羊布氏杆菌（Br.ovis）05沙林鼠布氏杆菌（Br.neotomae）06犬布氏杆菌（Br.canis）6个种。07毒力差异在不同种别和生物型，甚至同型细菌的不同菌株之间毒力差异明显。01对豚鼠的致病性顺序是02马尔他布氏杆菌≥猪布氏杆菌≥流产布氏杆菌＞沙林鼠布氏杆菌≥犬布氏杆菌＞绵羊布氏杆菌。03本菌不产生外毒素，但有毒性较强的内毒素。引致多种动物和人的布氏杆菌病。细菌可经气溶胶传播，是潜在的生物武器。潜伏期2周至7个月，一旦侵入血流，则出现菌血症，由于内毒素的作用致使机体发热。光滑型的流产布氏杆菌入侵机体粘膜屏障后，被吞噬细胞吞噬成为胞内寄生菌，并在淋巴结生长繁殖形成感染灶。之后细菌定位于网状内皮系统、乳腺及生殖器官。在妊娠中期，细菌在富含赤藓醇的胎盘绒毛膜及其周边大量繁殖，导致坏死性胎盘炎，致使孕畜流产。4.微生物学诊断01鉴于布氏杆菌病有可能由实验室感染所致，所以发达国家规定凡涉及本菌的样本检测，均应在生物安全2级实验室进行，凡涉及本菌的培养，则需在生物安全3级实验室内操作。02布氏杆菌病常表现为慢性或隐性感染，其诊断和检疫主要依靠血清学检查及变态反应检查。细菌学检查仅用于发生流产的动物和其它特殊情况。（1）细菌学检查01病料最好用采集流产胎儿的胃内容物、肺、肝和脾以及流产胎盘和羊水等。02也可采用阴道分泌物、乳汁、血液、精液、尿液以及急宰病畜的子宫、乳房、精囊、睾丸、附睾、淋巴结、骨髓和其它有局部病变的器官。03显微镜检查病料可直接涂片染色镜检，作革兰氏和柯兹洛夫斯基染色镜检。（2）分离培养鉴定无污染病料:可直接划线接种于前述适宜培养基，1污染病料:则应接种到加有放线菌酮0.1mg/ml、杆菌肽25IU/ml、多粘菌素B6IU/ml和加有色素的选择性琼脂平板。均一式接两套份，分别置大气环境及5%~10%CO2环境，37℃培养。每3d观察一次，如有细菌生长，可挑选可疑菌落做细菌鉴定；如无细菌生长，可继续培养至30d后，仍无生长者方可认为阴性。2挑选可疑菌落，做涂片、染色和镜检，确定为疑似菌后进行纯培养，再以布氏杆菌抗血清（高免血清或A、M单相血清，如不凝时，可再用R血清）作玻片凝集试验。3PCR法作快速诊断。4