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不飞则已,一飞冲天;不鸣则已,一鸣惊人。——《韩非子》
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动物肝脏中DNA的提取及检测
一、前言
脱氧核糖核酸
脱氧核糖核酸〔DNA,为英文Deoxyribonucleicacid的缩写,又
称去氧核糖核酸,是脱氧核糖核酸染色体的主要化学成分,同时也是
组成基因的材料。有时也被称为组成基因的材料。有时也被称为遗传微粒遗传微粒原因是在繁殖过程中,
父代会把它们自己DNA的一部分复制传递到子代中,从而完成性状的
传播。
DNA是高分子聚合物,DNA溶液为高分子溶液,具有很高的粘度,可
被甲基绿染成绿色。DNA对紫外线〔260nm有吸收作用,利用这一特性,
可以对DNA进行含量测定。当核酸变性时,吸光度升高,称为增色效
应;当变性核酸重新复性时,吸光度又会恢复到原来的水平。较高温
度、有机溶剂、酸碱试剂、尿素、酰胺等都可以引起DNA分子变性,
即DNA双链碱基间的氢键断裂,双螺旋结构解开—也称为DNA的解螺
旋。
在细胞内,DNA能与蛋白质结合形成染色体,整组染色体则统称为
染色体组。对于人类而言,正常的体细中含有46条染色体。染色体在
细胞分裂之前会先在分裂间期完成复制,细胞分裂间期又可划分为:
G1期-DNA合成前期、S期-DNA合成期、G2-DNA合成后期。对于真核
生物,如动物、植物及真菌而言,染色体主要存在于细胞核内;而对于
原核生物,如细菌而言,则主要存在于细胞质中的拟核内。染色体上的
染色质蛋白,如组织蛋白,能够将DNA进行组织并压缩,以帮助DNA与
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不飞则已,一飞冲天;不鸣则已,一鸣惊人。——《韩非子》
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其他蛋白质进行交互作用,进而调节基因的转录。
脱氧核糖核酸的结构
DNA的结构:DNA的结构一般可划分为一级结构、二级结构、三
级结构和四级结构四个水平。
DNA是一种长链聚合物,组成单位为四种脱氧核苷酸,即腺嘌呤脱
氧核苷酸〔dAMP脱氧腺苷、胸腺嘧啶脱氧核苷酸〔dTMP脱氧胸苷、
胞嘧啶脱氧核苷酸〔dCMP脱氧胞苷、鸟嘌呤脱氧核苷酸〔dGMP脱氧
鸟苷。而脱氧核糖〔五碳糖与磷酸分子借由酯键相连,组成其长链骨
架,排列在外侧,四种碱基排列在内侧。每个糖分子都与四种碱基里的
其中一种相连,这些碱基沿着DNA长链所排列而成的序列,可组成遗
传密码,指导蛋白质的合成。读取密码的过程称为转录,是以DNA双链
中的一条单链为模板转录出一段称为mRNA〔信使RNA的核酸分子。
DNA是由许多脱氧核苷酸按一定碱基顺序彼此用3’,5’-磷酸
二酯键相连构成的长链。大多数DNA含有两条这样的长链,也有的DNA
为单链,如大肠杆菌噬菌体φX174、G4、M13等。DNA有环形DNA和
链状DNA之分。在某些类型的DNA中,5-甲基胞嘧啶可在一定限度内
取代胞嘧啶,其中小麦胚DNA的5-甲基胞嘧啶特别丰富。在某些噬菌
体中,5-羟甲基胞嘧啶取代了胞嘧啶。40年代后期,查加夫
〔E.Chargaff发现不同物种DNA的碱基组成不同,但其中的腺嘌呤数
等于其胸腺嘧啶数〔A=T,鸟嘌呤数等于胞嘧啶数〔G=C,因而嘌呤数之
和等于嘧啶数之和,一般用几个层次描绘DNA的结构。
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