高效液相注意事项 .pdfVIP

高效液相色谱仪使用注意事项

1、使用流速一般为1.0ml/min，最高不超过3.0ml/min（制备），压力一般不超过

25MPa，最高不超过30MPa。

2、使用温度一般不高于50℃，最高不高于60℃（特殊要求的除外）。

3、试剂瓶上应注明试剂名称，配制人员以及配制日期，同时写好仪器使用记录。

4、开机后，先用色谱乙腈或甲醇（使用前要超声，脱气）冲洗约30分钟，流动

相中若含磷酸盐缓冲液，用5%乙腈或8％甲醇溶液（配制后超声，脱气）冲洗

约30分钟再换流动相；若不含磷酸盐缓冲液，可直接换流动相；若不含有机溶

剂,用注射用水冲洗约30分钟再换流动相。更换时注意停泵！

5、分析完毕，用5%乙腈或8％甲醇溶液冲洗约30分钟再换乙腈或甲醇冲洗约

30分钟。

6、流动相使用前用有机滤膜过滤，超声波脱气约2分钟，使用时间一般不超过

2天，且每次使用前都要重新抽滤。

7、注射用水、5%乙腈或8％甲醇溶液使用前用0.45微米有机滤膜过滤（若过滤

速度太慢可用少量乙腈冲洗滤膜），超声波脱气约2分钟，当天配制，当天使用。

8、冲洗用乙腈和甲醇用0.45微米有机滤膜过滤，以后每3天用0.45微米有机滤

膜过滤1次。

9、使用微孔滤膜时应注意水系和有机系，水系滤膜不能用于抽滤含有有机溶剂

的溶液，过滤装置目前实验室只有一套，请大家一定倍加珍惜，过滤时，实验

人员必须守在旁边。

10、所用水均为超纯水或市售哇哈哈用水（限当天使用），乙腈、甲醇均为色谱

纯。

11、样品进样前，必须用色谱级溶剂溶解，再经有机滤头过滤，方可进样。

12、使用过程中，注意压力变化，若压力过低或者过高，及时查明原因。

注：以上注意事项以C18柱为例，若为其它特殊色谱柱，要根据要求相应调整。

13、戴安液相分析和制备时需更换定量环及检测池，请根据需要更换，若有疑问，

请咨询负责人。

特殊柱子的使用：

1、阳离子柱：不能接触有机溶剂，一般保存在水中，使用时注意管路中的有机

溶剂。

2、硅胶柱：反相：使用时同C18柱；正相：注意溶剂的混溶，正己烷、正庚烷

与甲醇、水、乙腈不互溶，可用异丙醇过渡。

高效液相色谱仪维护

1、保持仪器室和仪器的干净整洁，同时打开排风扇保持室内良好的通风。

2、每次开机仪器均应通过自检，否则根据说明书的要求进行处理，在任何时候

出现异常情况或若遇操作人员处理不了的情况时，需及时报请相关领导批准后进

行处理或请专业维修人员进行处理。

3、每次开机时，流速和柱压要逐渐增加，突然迅速增加，会使柱床受到冲击，

引起紊乱，产生空隙。

4、在进样前使色谱系统充分平衡，是否平衡可由基线加以判断。

5、在进样前，检查色谱系统的各个接头，通常由此能发现是否有漏液现象。如

有漏液，空气会从漏缝进入系统引起基线漂移，影响峰高和峰面积的重复性。

6、不要把柱接头上得太紧，否则易损坏接头螺纹，引起渗漏。

7、不要把柱子放在有气流的地方或直接放到阳光下，气流和阳光都会使柱子产

生温度梯度造成基线漂移；如果怀疑基线漂移是由温度梯度引起的，可以设法使

柱子恒温。

8、若仪器用做常规分析，样品种类有限，但分析次数很多，则不妨为每一类常

规分析配置一根专用柱，这样有助于延长柱寿命。

9、如果怀疑样品会污染色谱柱，可以用合适的溶剂（几百毫升）慢慢冲洗柱子

过夜，第二天早晨再用流动相重新平衡柱子（约3min）。

10、在因装卸、更换、贮存等而挪动柱子时，动作要轻，不要使其受到碰撞，以

免柱床因震动产生空隙或通道。

11、柱要加标签，新旧分开，不要放在温度变化很大的地方。

12、使用人在使用液相前请自觉检查好液相、进样针等相关设备的性能，如发

现损坏，请使用前通知负责人。使用中出现相关损毁的，所造成的后果由当时

使用人全部负责。

使用高效液相的时间安排：星期一至星期五，08:30之前必须开机，每人每次使

用不超过三天，请抓紧时间，三天之后请自觉让给后面的人做，晚上通宵做实

验的不做安排，严禁做液相时走走停停！

请大家按相关规定正确使用高效液相，未按规定使用

的，一经发现，通报批评。