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君子忧道不忧贫。——孔丘

第十章单克隆抗体技术

（Monoclonalantibodytechnique）

一、原理

B淋巴细胞在抗原的刺激下，能够分化、增殖形成具有针对这种抗原分泌特异

性抗体的能力。B细胞的这种能力和量是有限的，不可能持续分化增殖下去，因此

产生免疫球蛋白的能力也是极其微小的。将这种B细胞与非分泌型的骨髓瘤细胞融

合形成杂交瘤细胞，再进一步克隆化，这种克隆化的杂交瘤细胞是既具有瘤的无限

生长的能力，又具有产生特异性抗体的B淋巴细胞的能力，将这种克隆化的杂交瘤

细胞进行培养或注入小鼠体内即可获得大量的高效价、单一的特异性抗体。这种技

术即称为单克隆抗体技术。

制备单克隆抗体的方法是用缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转化酶或胸腺嘧啶核苷酸酶

的瘤细胞变异株与脾脏的B细胞融合。采用HAT选择性培养基（培养基中加次黄

嘌呤HyPoxanthineH，氨基喋呤AminoopterinA及胸腺嘧啶核苷ThymidineT），在

这种选择性培养基中，由于变异的瘤细胞不具有次黄嘌呤磷酸核糖转化酶或胸腺嘧

啶核苷激酶，所以不能利用培养基中的次黄嘌呤或胸腺嘧啶核苷而合成DNA。而只

能利用谷酰胺与尿核苷酸单磷酸合成DNA，这一途径又被氨基喋呤所阻断，所以未

融合的瘤细胞不可避免也要死亡。融合的杂交瘤细胞由于脾淋巴细胞具有次黄嘌呤

磷酸核糖转化酶，可以通过次黄嘌呤合成DNA，克服氨基喋呤的阻断，因此杂交瘤

细胞大量繁殖而被筛选出来。B淋巴细胞在一般培养基中不能长期生长，一般于二

周内均死亡。

单克隆抗体与常规抗体相比有如下优点：①单一特异性，与一个抗原决定簇反

应；②可重复性，能够提供完全一样的抗体制剂；③一经制出，可无限量地供应；

④生产单克隆抗体，不一定需要纯的抗原；⑤能查出混合物中存在的用常规方法查

不出的少量成分。

单克隆抗体与常规的血清抗体的性质比较，见表10-1。

表10-1单克隆抗体与常规抗血清的性质比较

性质常规血清抗体单克隆抗体

抗体含量少μg/ml多mg/ml

君子忧道不忧贫。——孔丘

无关的Ig多少或几乎无

其它血清蛋白有少，培养物上清常有10

％胎牛血清

Ag-Ab结合免疫原的全部成分的全部免疫原中的一种成分的

抗原决定簇一个抗原决定簇

特异性亲和力的重复性不同批号间有变化无变化

与其它抗原的交叉反应与带有共同抗原决定簇的一般无。结合到共同决定

抗原有部分交叉簇则是完全的

免疫球蛋白的种类与亚类完全是混合的只是一种或几种

免疫球蛋白的物理性质典型光谱抗体的单一性质