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分离固氮菌分离自养型微生物加入青霉素的培养基123654不加含碳有机物的无碳培养基分离酵母菌、霉菌等真菌分离金黄色葡萄球菌不加氮源的无氮培养基加入高浓度食盐的培养基选择培养基(三)培养基(1)按物理状态分:(2)按功能分:(3)按成分分:总结:1.培养基的类型固体培养基液体培养基半固体培养基选择培养基鉴别培养基天然培养基合成培养基3.培养基的成分不管哪种培养基,一般都含有水、无机盐、碳源和氮源等营养物质,另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求.2.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方血清中含有:①多种蛋白质(白蛋白、球蛋白、铁蛋白等)②多种金属离子;③激素;④促贴附物质,如纤粘蛋白、冷析球蛋白、胶原等。⑤各种生长因子⑥转移蛋白⑦不明成分人工合成培养基只能维持细胞生存,要想使细胞生长和繁殖,还需补充一定量的天然培养基(如血清)。成功地培养微生物的关键。无菌操作泛指在培养微生物的操作中,所有防止杂菌污染的方法。1.无菌技术的概念(四)无菌技术2.消毒与灭菌的概念及两者的区别3.常用的消毒与灭菌的方法比较项目理化因素的作用强度消灭微生物的程度芽孢和孢子能否被消灭消毒较为温和部分生活状态的微生物不能灭菌强烈全部微生物能01020304煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min。巴氏消毒法:70-75℃下煮30min或80℃下煮15min。化学药剂消毒法:用75%酒精、新洁尔灭等进行皮肤消毒;氯气消毒水源。紫外线消毒。消毒的方法:3.常用的消毒与灭菌的方法01日常生活经常用到的是煮沸消毒法;02对一些不耐高温的液体,则使用巴氏消毒法(例如牛奶);03对接种室、接种箱或超净工作台首先喷洒石炭酸或煤酚皂等溶液以增强消毒效果,然后使用紫外线进行物理消毒。04实验操作者的双手使用酒精进行消毒;05饮水水源用氯气进行消毒。消毒的方法灭菌的方法:灼烧灭菌接种环、接种针、试管口等的灭菌干热灭菌:160-170℃下加热1-2h。高压蒸气灭菌:100kPa、121℃下维持15-30min.如培养基、无菌水等的灭菌如玻璃器皿、金属用具等的灭菌高压蒸气灭菌的原理是()高压使细菌DNA变性高压使细菌蛋白质凝固变性高温烫死细菌高温使细菌DNA变性B灼烧灭菌高压蒸气灭菌干热灭菌紫外线灭菌如表面灭菌和空气灭菌等,所用器械是紫外灯。1234灭菌的方法:关于灭菌和消毒的不正确的理解是关于灭菌和消毒的不正确的理解是A.消毒和灭菌实质上是相同的B.灭菌是指杀死环境中的一切微生物的细胞、芽孢和孢子C.接种环用烧灼的方法灭菌D.常用灭菌方法有加热法、过滤法、红外线法、化学药品法A旁栏思考1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外,还有什么目的?2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要,请选择合适的方法。(1)培养细菌用的培养基与培养皿(2)玻棒、试管、烧瓶和吸管(3)实验操作者的双手答:无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。答:(1)、(2)需要灭菌;(3)需要消毒。01器具的灭菌05微生物接种04倒平板02培养基的配制03培养基的灭菌06恒温箱中培养07菌种的保存二、微生物实验室培养的基本操作程序涂布器接种环接种针配方:a.制备牛肉膏蛋白胨培养基(用于培养细菌)计算、称量溶化调pH:pH7.6过滤:这一步可以省去。分装:分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上,以免沾污棉塞而引起污染。分装三角烧瓶的量以不超过三角烧瓶容积的一半为宜。加塞包扎操作步骤将50ml培养基用玻棒转移至三角锥瓶中,塞上棉花塞,包上牛皮纸,再放入高压蒸气灭菌锅,在压力为100kPa、温度为121℃,灭菌15~30min。将培养基用旧报纸包裹,放入干热灭菌箱内,在160~170℃下灭菌2h。8.灭菌:待培养基冷却到50℃左右时,在酒精灯附近倒平板。(倒平板操作见课本)2d后观察平板,无杂菌污染才可用来接种.无菌检查:将灭菌的培养基放入37℃的温室中培养24—48小时,以检查灭菌是否彻底。9.倒平板:倒平板操作1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外,还有什么目的?2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要,请选择合适的方法。⑴培养细菌用的培养基与培养皿
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