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蛋白质水解物在动物营养中的作用
蛋白质是一种大分子物质,通常由二十种不同的氨基酸通过肽键
连接组成。蛋白质是动物组织(如骨骼肌、乳腺、肝脏和小肠)和畜产
品(如肉、牛奶、鸡蛋和羊毛)的重要组成成分。例如,生长期肉牛和
育肥猪骨骼肌中的蛋白质含量约占干物质总量的70%(Wu等,2016)。
因此,摄入充足的蛋白质对家畜、家禽和鱼类发挥最大生长、生产性
能和饲料效率都是必不可少的。Wu(2013)报道,饲料中的蛋白质(如
血粉、肉、骨粉、肠黏膜粉、豆粕、花生粕、棉籽粕)在小肠中蛋白
酶的作用下被水解成小肽(二肽、三肽)和游离氨基酸。水解生成小肽
的类型与动物生理状况和日粮组成密切相关。动物和植物性蛋白质饲
料在被采食前通过化学处理、酶或者微生物发酵,可改善其营养品质、
降低抗营养因子的含量并产生肽类(Dieterich等,2014;Pasupuleki
等,2010)。此外,酶解和微生物发酵可以提高动物和植物性蛋白质
饲料中小肽的溶解度、黏度、乳化性和凝胶化程度。
不同来源(细菌、植物和酵母)的蛋白酶均可用来酶解动物和植物
性蛋白质饲料,多种微生物通过发酵,将动物或植物性蛋白质饲料水
解生成肽类。目前,蛋白质水解物已广泛应用于医学、营养(包括动
物营养)和生物技术领域(Pasupuleki等,2010)。本文主要对通过酶
解技术和微生物发酵技术生成蛋白质水解物的相关研究进行综述,并
对其在动物饲养中营养及生理学功能进行探讨。
1氨基酸、肽和蛋白质的定义
氨基酸是含有氨基和酸基基团的有机物。除甘氨酸外,所有蛋白
源氨基酸均有一个α-氨基,并可在动物体内和饲料中形成L-异构
体。肽被定义为由2个或2个以上氨基酸残基通过肽键连接成的有机
分子(Wu,2013),每形成一个肽键脱去一分子水。寡肽由2~20个氨
基酸残基组成。含有小于或等于10个氨基酸残基的寡肽称作小寡肽
(或简单的小肽),而含有10~20个氨基酸残基的寡肽称为大寡肽。
Kyte(2006)认为,超过20个氨基酸残基组成的肽被称为多肽。蛋白
质是一种高分子量的多肽,通过肽键将相邻氨基酸分子的α-氨基和
α-羧基连接。
通过分子质量大小可区分多肽和蛋白质。Kyte(2006)认为,分子
质量大于或等于8000Da的多肽(即≥72个氨基酸)被称为蛋白质。例
如,泛素(含72个氨基酸的单链)和酪蛋白α-S1(含200个氨基酸)
称为蛋白质,而胰高血糖素(含有29个氨基酸)和催产素(9个氨基酸)
称为肽。然而通过分子质量大小区分多肽和蛋白质的方法并不是绝对
的。例如,胰岛素[51个氨基酸(A链含20个氨基酸和B链含31个氨
基酸)]具有典型的蛋白质3级结构,因此被公认为一种蛋白质。而从
猪小肠黏膜中分离得到的PEC-60(含60个氨基酸的单链)(Agerberth
等,1989)和dopuin(含62个氨基酸的单链)(Chen等,1997)被称为
多肽。三氯乙酸(TCA,终浓度5%)或高氯酸(PCA,终浓度0.2M)可完
全沉淀动物组织、细胞、血浆和其他体液(例如,瘤胃、尿囊、羊膜、
肠腔液和食糜)(Rajalingam等,2009)中的蛋白质。同样,乙醇(终
浓度为80%)也可以有效地沉淀水溶液中的蛋白质和核酸
(Wilcockson1975)。这种方法可以有效去除蛋白质水解物中的水溶性
无机化合物(如铝盐化合物)。
2蛋白质水解物
蛋白质在酶、微生物、酸、碱作用下可产生蛋白质水解产物。工
业上生成蛋白质水解物常用的蛋白源包括动物性蛋白质(如酪蛋白、
乳清蛋白、肉类)和植物性蛋白(如小麦、水稻、大豆、豌豆和棉籽
等)(Dieterich等,2014;Pasupuleki等,2010;Pasupuleki等,2010)。
蛋白质水解的方法不同,水解时间也从1~100h不等。酶或微生物水
解过程中添加抑菌或杀菌防腐剂(如苯甲酸)可延长其水解时间,通过
加热可使酶失活从而终止水解反应。水解结束后,可通过离心、过滤
或微过滤系统分离蛋白质水解物中的不溶性物质。多次过滤后可获得
预期的透明清晰的水解溶液。必要时可通过炭粉进行脱色并除去溶液
中的混浊物质。若需要除去水解产物中的盐,可将滤液进一步通过交
换色谱,除去水解物中多余的盐。蛋白质水解产物中的微生物可以通
过热处理(巴氏杀菌)的方法消除。最
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