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吾日三省乎吾身。为人谋而不忠乎?与朋友交而不信乎?传不习乎?——《论语》
基于SYBRGreen实时定量PCR法在抗汉坦病毒药物评价与筛选
中的应用
卫飞凌佳馨李宁李金林陈良君熊海蓉罗凡刘媛媛杨占秋・
【摘要】目的建立一种体内外用于精确评价与筛选抗汉坦病毒药物的方法。
方法以汉坦病毒S基因,哺乳动物和鼠甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)基因的
保守序列为靶序列,利用Primerv3.0软件设计三对实时定量PCR引
Express
物,建立了汉坦病毒的SYBRGreen实时定量PCR检测方法,并将其应用到抗汉
坦病毒药物的评价与筛选中。结果将汉坦病毒,哺乳动物和鼠GAPDH靶基因连
接pGEM—T载体,构建重组质粒,经过梯度稀释后作为标准品,根据标准品稀释
度与Ct值的关系,获得扩增效率良好及可信度高的标准曲线。结论该方法可
以用于体内外评价和筛选抗汉坦病毒药物,具有现实指导意义。
【关键词】汉坦病毒;qPCR;抗病毒药物;评价
ofSYBRGreen。’baresealdtimefor
Applicationassay
virusionand
i-Hantaanevaluat
antcompoundsscreening
Fei
Wei,Jia—XinLi,Jin—LLini,Liang—Jun
Ling,NingChen,Hai—RoXnigong,FaLuon,
Yuan—Yuan
Liu,Zhan—Qiu
Yang*
(StateofAntiviralandAntitumor
ofLaboratory
KeyLaboratoryVirology:Herbal
StateAdministratiofonTraditionCalhineseMedicine&InstitutofeMedical
CenterofFoodandEvaluation:MediScalchoolWuhan
Virology:ResearchDrug
430071:China)
University:Wuhan
Toestablishreal—’timePCR
[Abstract]Objective
aquantitative
assay
fordetectiaonndevaluatiofonanti—Hantaavirnusi
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