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CRISPR核酸快检一体机解答

理想的病原体核酸检测方式应该是准确、灵敏、快速、廉价、

便携，并且能在各种环境下对任何病原体进行检测。近年来，基

于成簇间隔的短回文重复序列及其关联蛋(clusteredregularly

interspacedshortpalindromicrepeats/CRISPR-associated

proteins,CRISPR/Cas)的新型分子诊断工具，似乎具有成为这

样理想化核酸检测平台的潜力。

01下一代分子诊断技术！

从1987年首次发现CRISPR,到最近几年

CRISPR-associated(Cas)技术的广泛应用，以及2020年的诺贝

尔化学奖颁给了CRISPR的发现者，CRISPR技术被誉为会改变和

造福人类的发明。短短几年时间，CRISPR技术成为科研界的热

门内容，被称为下一代分子诊断技术！

CRISPR

而关于技术在临床领域及新冠检测方面的应用，

也成为了近期的讨论热点。中国科学院赵国屏院士、复旦大学附

属中山医院胡必杰主任就在2020迪拜世博会中国馆上海日《走

近伯杰，了解新冠抗疫中国方案、中国速度》专题直播中，围绕

CRISPR

着新冠核酸快速检测技术，带来了关于技术干货满满的

分享与讨论。

02从新冠核酸检测说开去

在专题讲座《速度为先I新冠核酸快速检测技术的应用及展

望》中，胡必杰教授提出对于现在新型冠状病毒，国家提到了快

速检测，上海市自10月28日起，全市首批21家二级以上综合

性医疗机构面向市民提供24小时核酸检测服务，争取6小时出

报告，对于现在新冠快速核酸检测技术，与赵院士一起探讨了值

得期待和进一步开发的技术和应用。

赵国屏院士以新冠为例，讲到对于一个“好的”临床检验产品

有5个关键要求：

第一，就是要正确，不能“错怪好人”，不能出现“假阳性;

必须准确，不能“张冠李戴”，专一性、特异性要好。第二一定

要灵敏，也就是说不能“放过坏人”，不能出现假阴性。第三最

好能够“定量好能够“定量。定量是确定检测结果准确与否的重要佐证。第

四，要快速，简便；第五成本要尽可能低。

胡必杰教授表示，赵院士提到的“不抓错好人”、“不放过

坏人”，同时定量，让临床医生更加精准地去辨别是感染的病原

体还是污染的病原体，同时简捷方便与价优，是非常重要的。如

果一项分子诊断技术非常昂贵，很多病人享受不到，只有达到以

上五点要求，这项技术才能广泛应用到临床，最终让老百姓和普

通病人得益。

03等温扩增与CRISPR诊断技术的有机结合

而后赵院士提到，在过去几十年的时间里，等温扩增技术得

到了极大的发展，现有也已经开发了很多种方法体系，包括经典

LAMPRPA

技术和技术。等温扩增有快速灵敏，对仪器要求低，

是分子P0CT诊断领域重要的技术力量。

第二项技术即是最近发展的CRISPR诊断技术。主流CRISPR

诊断技术主要基于CRISPR-Casl2或Casl3来开发，利用了Cas

蛋白“反式切割活性”，可以将体系中的单链核酸高效的切割。

所以，CRISPR诊断的原理就是：当待检体系中存在靶标核

酸时，Cas蛋白在向导RNA的引导下特异识别靶标序列，形成复

合物，进而被激发出针对切割单链核酸的“反式切割活性“，将

体系中的荧光标记探针切碎，发出荧光信号，完成检测过程，通

过检测体系是否发光来判断靶标核酸是否存在。

将恒温扩增和CRISPR诊断技术结合起来，既可以利用恒温

CRISPR

扩增的快，灵敏和简便，又可以利用