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高效液相色谱法操作步骤

高效液相色谱法的操作步骤如下:

1.过滤流动相并根据需要选择不同的滤膜。溶剂必须为色谱纯，且溶剂及样品必须过膜（0.45

μm）。超声脱气30分钟以上。

2.用流动相冲洗金属过滤器，然后将过滤器浸入储液罐的流动相中。有一段时间没用或者

换了新的流动相，需要先冲洗泵和进样阀。

3.将储液罐放置在一定的高度，以避免由于搬运和其他操作人员的移动而造成不必要的跌

落。

4.然后按以下顺序依次启动高效液相色谱仪：泵→检测器→高效液相色谱软件→设置软件

参数，如分析时间、检测波长、流速等。

5.启动泵，运行5分钟，主要是为了排除系统中的气泡，结束后关闭所有排气阀。

6.然后按照预先计划的速度，以固定的速率，如1mL/min左右，运行流动相，走基线，直

到基线平稳。

7.基线平稳后，在软件中设置样品的运行参数，如流速和分析时间等。分析时间会因样品、

流速、柱长等因素变化。

8.设计走样方法。

9.在进样和进样后操作的过程中，需要及时调整和监控各项参数。