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丹青不知老将至，贫贱于我如浮云。——杜甫

标题：乙型肝炎病毒表面抗原诊断（酶联免疫法）SOP文件版本号：修订号：

文件编号：生效日期：

编制人：审核人：发布部门：质量管理小组

乙型肝炎病毒表面抗原诊断（酶联免疫法）SOP文件

本试剂盒在微孔条上预包被纯化的乙肝表面抗体（HBsAb），配以酶标

记抗体（HBsAb-HRP）及TMB等其它试剂，采用夹心法原理检测人血清

（或血浆）中乙肝表面抗原（HBsAg）。

试剂盒组成：

名称48人份96人份480人份名称48人份96人份480人份

1、包被板条1块1块5块7、底物液A1瓶1瓶1瓶

2、酶标抗体1瓶1瓶1瓶8、底物液B1瓶1瓶1瓶

3、阳性对照1支1支1支9、终止液1瓶1瓶1瓶

4、阴性对照1支1支1支10、封板膜3张3张15张

5、样品稀释液1支1支1支11、自封袋1个1个1个

6、浓缩洗涤液1瓶1瓶1瓶12、说明书1份1份1份

操作步骤：

1.平衡：将试剂盒各组分从盒中取出，平衡至室温（18-25℃），微孔

板开封后，余者即时以自封袋封存。

2.配液：浓缩洗涤液配置前充分摇匀（如有晶体应充分溶解），浓缩洗

涤液和蒸馏水或去离子水按1:19稀释后使用。

3.编号：取所需数量微孔条固定于支架，按序编号。

4.稀释：每孔加入20μl样品稀释液。

丹青不知老将至，贫贱于我如浮云。——杜甫

5.加样：分别在相应孔中加入100μl阴、阳性对照血清或待测样品。

6.温育：置37℃温育60分钟。

7.加酶：分别在每孔中加入酶标记抗体50μl。

8.温育：置37℃温育30分钟。

9.洗涤：用洗涤液充分洗涤5次，洗涤后扣干（每次应保持30-60秒

的浸泡时间）。

10.显色：每孔加底物A、B各50μl，轻拍混匀，37℃暗置30分钟。

11.终止：每孔加入终止液50μl，混匀。

12.测定：用酶标仪单波长450nm或双波长450nm/630nm测定各孔OD

值（用单波长测定时，需用空白对照孔归零），并记录结果。

结果判定：

1、临界值（C.O.）=2.1×阴性对照孔OD平均值（阴性对照OD均值小

于0.05时以0.05计算）。

2、结果判定：

1）样本OD值S/C.O.≥1者为HBsAg阳性；反之，判为HBsAg阴性。

2）阴性对照OD均值0.1或阳性对照OD均值≤0.4时，实验无效，

应重新实验。

注意事项：

1.操作应按说明书严格进行。

2.所有样本、试剂和各种废弃物应按传染物处理。严格防止交叉感染，

严格健全和执