HPLC 操作规程 _原创文档.pdf

转载：《分析测试百科网》高效液相色谱仪（Agilent1100型）操作规程

不知道楼主要什么型号的液相色谱使用方法？

一、开机

1、开机前准备：流动相使用前必须过0.45um的滤膜（有机相的流动相必须为色

谱纯；水相必须用新鲜注射用水，不能使用超过3天的注射用水，以防止长菌或

长藻类）；把流动相放入溶剂瓶中。A瓶：为水相B瓶：为有机相。

2、打开电脑，选Win2000，进入Win2000界面。

3、双击CAGBoodpserver图标，放大CAGBoodp

server小图标，出现窗口，5min内打开液相各部件电源开关，等待1100广播信

息后，表示通讯成功连接，关闭CAGBoodpserve窗口。

4、双击online图标，仪器自检，进入工作站。

该页面主要由以下几部分组成：

——最上方为命令栏，依次为File，RunControl，Instrumen…等；

——命令栏下方为快捷操作图标，如多个样品连续进行分析、单个样品进样分析、

调用文件保存文件……等；

——中部为工作站各部件的工作流程示意图；依次为进样器-输液泵-柱温箱-检测

器-数据处理-报告；

——中下部为动态监测信号；

——右下部为色谱工作参数：进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱

温、检测波长等。

4、从“View”菜单中选择“Methodandcontrol”画面。

二、编辑参数及方法

1、开始编辑完整方法：

从“Method”菜单中选择“Newmethod”，出现DEF-

LC.M，从“Method”菜单中选择“Editentire

method”，选择方法信息、仪器参数及收集参数、数据分析参数和运行时间表等

各项，单击OK，进入下一画面。

2、方法信息：

在“MethodComments”中加入方法的信息，如方法的用途等。单击OK，进

入下一画面。

3、泵参数设定：

进入“Setuppump”画面，在“Flow”处输入流量，如1ml/min；在“Solvent

B”处输入有机相的比例如70.0，（A=100-B），也可在Insert

一行“Timetable”，编辑梯度；输入保留时间；在“PressureLimits

Max”处输入柱子的最大耐高压，以保护柱子。单击OK，进入下一画面。

4、DAD检测器参数设定：

进入“DADsignals”画面，输入样品波长及其带宽、参比波长及其带宽（参

比波长带宽默认值为100nm）；选择Stoptime：asPupm；

在“Spectrum”中输入采集光谱方式“store”：选All；如只进行正常检测，则可选N

one；范围Range：可选范围为190~950nm；步长Step可选2.0nm；

阀值：选择需要的灯；

Peakwidth（Response

time）即响应值应尽可能接近要测的窄峰峰宽，可选“2s”或4s；

Slit-：狭窄缝，光谱分辨率高；宽时，噪音低。可选4nm

单击OK，进入下一画面。

5、进入“SignalDetails”画面，单击OK，进入下一画面。

6、进入“EditIntegration

Events”（编辑积分结果）画面，单击OK，进入下一画面。

7、进入“Specifyreport”（积分参数）画面，单击OK，进入下一画面。

8、进入“Instrumentcurves”画面，单击OK，进入下一画面。

9、进入“RunTimechecklist”（运行时间表）画面，选择“Date

Acquistition”和“StandardDate

Analsis”，单击OK，完成参数设定，回到工作站画面。

10、单击“Method”菜单，选中“Savemethod

as”，输入文件名，单击OK。（路径：e\HPCHEM\1\methods\***）

注：如果调用一个方法，则在“Method”菜单，选中“Load

method”，选方法名，单击OK。

11、从菜单“View”中选择“Onlinesignal”，选中Window

1，然后单击Change钮，将所要绘图的信号移到右边的框中，点OK。（如同

时检测二个信号，则重复11，选中Window2）。

三、运行样品

1、单击泵（Pump）图标下面的小瓶图标，输入溶