专题2微生物的培养与应用.pptVIP

考点一微生物的实验室培养培养基液体培养基:配制成的液体状态的基质,一般用于生产。(1)种类:按培养基的物理性质分类。固体培养基:在液体培养基中加入凝固剂(如琼脂),配制成的固体状

态的基质,琼脂固体培养基是实验室中最常用的培养基之一。基本营养要素:各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐。

此外还要满足不同微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的需

求。(2)培养基配方及营养要素。条件结果常用的方法消毒较为温和的物

理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法灭菌强烈的理化因

素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌2.无菌技术(1)消毒和灭菌的区别。(2)无菌技术具体操作。对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒。将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在酒精灯火焰附近

进行。实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。3.纯化大肠杆菌以及菌种的保藏(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基:计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。(2)纯化大肠杆菌。①原理:在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞,使其长成单个的

菌落,这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。②方法:平板划线法、稀释涂布平板法。(3)菌种的保藏。①短期保存:固体斜面培养基上4℃保存,菌种易被污染或产生变异。②长期保存:-20℃甘油管在冷冻箱中保藏。单击此处添加小标题提示酒精消毒时,70%的酒精杀菌效果最好,单击此处添加小标题原因是:浓度过高,使菌体表面蛋白质凝固成一层保护膜,乙醇分子不单击此处添加小标题能渗入其中;浓度过低,杀菌力减弱。【例1】回答下列问题。等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变

异类型容易选择、????、????等优点,因此常作为遗传学

研究的实验材料。(1)在大肠杆菌培养过程中,除考虑营养条件外,还要考虑????、皿进行????(消毒、灭菌);操作者的双手需进行清洗和????

气中的细菌可用紫外线杀灭,其原因是紫外线能使蛋白质

变性,还能????。(2)在微生物培养操作过程中,为防止杂菌污染,需对培养基和培养器若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数,要想使所得估计

值更接近实际值,除应严格操作、多次重复外,还应保证待测样品稀

释的????。单击此处添加标题通常,对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征

对细菌进行初步的????。单击此处添加标题培养大肠杆菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固

体培养基应采用的检测方法是???????。单击此处添加标题能丢弃,以防止培养物的扩散。若用大肠杆菌进行实验,使用过的培养基及培养物必须经过????单击此处添加标题解析:(1)大肠杆菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、易

培养、生活周期短等优点,培养过程中,除考虑营养条件外,还要考虑

温度、酸碱度和渗透压等条件。(2)灭菌是用强烈的理化因素杀死物

体内外所有的微生物,所以对培养基和培养皿进行灭菌;消毒是用较

为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害

的微生物,操作者的双手需要进行清洗和消毒,紫外线能使蛋白质变

性,还能损伤DNA的结构。(3)稀释涂布平板法是将菌液进行一系列

的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基

的表面,进行培养,应保证样品稀释的比例适合。(4)对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的鉴定。(5)培养大肠杆菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固

体培养基应采用的检测方法是将未接种的培养基在适宜的温度下放

置适宜的时间,观察培养基上是否有菌落产生。(6)因为有的大肠杆

菌会释放一种强烈的毒素,并可能导致肠管出现严重症状,使用过的

培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃,以防止培养物扩散。答案:(1)温度酸碱度易培养生活周期短(2)灭菌消毒损伤DNA的结构(3)比例合适(4)鉴定(或分类)(5)将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间,观察培养基

上是否有菌落产生(6)灭菌1.选择合适的培养基(1)根据培养基的用途可分为选择培养基和鉴别培养基。考点二土壤中分解尿素的细菌的分离与计数培养基种类特点用途选择培养基培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进所需要的微生物的生长培养、分离出特定微生物(如培养酵母菌和霉菌,可在培养基中加入青霉素;用尿素为唯一氮源