DB22_T 3494-2023 茄子抗褐纹病鉴定技术规程.docxVIP

ICS65.020CCSB05

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吉林省地方标准

DB22/T3494—2023

茄子抗褐纹病鉴定技术规程

TechnicalcodeofpracticeforresistanceevaluationofeggplantcultivarstoPhomopsisblight

2023-09-28发布2023-11-16实施

吉林省市场监督管理厅发布

DB22/T3494—2023

I

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规

定起草。

请注意本文件中的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由吉林农业大学提出。

本文件由吉林省农业农村厅归口。

本文件起草单位：吉林农业大学、吉林农业科技学院、辽宁省桓仁满族自治县农业发展服务中心。

本文件主要起草人：陈姗姗、赵春波、韩玉珠、李爽、赵靖、段微、吴春燕、于占东、张莹、曹鑫、任瑞敏。

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茄子抗褐纹病鉴定技术规程

1范围

本文件确立了茄子抗褐纹病鉴定的程序，规定了接种体制备、育苗、接种鉴定、病情调查、抗性评价等阶段的操作指示，描述了过程记录的追溯方法。

本文件适用于茄子品种资源对茄子抗褐纹病的室内鉴定及评价。2规范性引用文件

本文件没有规范性引用文件。

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。3.1

茄子褐纹病Phomopsisblightofeggplant

由半知菌类真菌茄褐纹拟茎点霉（有性态Diaporthevexans、无性态Phomopsisvexans）引起的一种真菌病害。

3.2

抗病性diseaseresistance

茄子品种（系）所具有的能够抵御或减轻茄子褐纹病侵染和危害的可遗传性状。3.3

接种体inoculum

用于接种茄子以引起茄子褐纹病的分生孢子或菌丝体。3.4

病情指数diseaseindex（DI）

全面考虑发病率与严重度两者的综合指标。

4程序框

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图1茄子抗褐纹病鉴定程序流程

5接种体制备

5.1病原物分离和纯化

采用常规组织分离法。从典型病斑的病健交界处，用无菌刀片切取5mm×10mm的病组织，75%乙醇消毒30s，无菌水冲洗3次～4次，用无菌滤纸吸干组织块表面水分，置于马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）培养基中，每皿接入3块～5块，用封口膜将培养皿封口后置入25℃恒温箱中暗培养。待长出分生孢子器后，单孢法纯化获得纯培养物。

5.2茄子褐纹病菌的鉴定和保存

对经过柯氏证病法则验证的有致病性的分离物进行形态学观察。与茄子褐纹病菌（见附录A）形态一致的分离物编号，用滤纸片法-20℃冰箱长期保存菌种。

5.3接种体的繁殖和保存

5.3.1将菌种转接于PDA培养基，置于25℃恒温箱中培养7天后，用内径为6mm的打孔器从菌落边缘打取菌饼，转接于PDA平板，培养至21天长出分生孢子器。

5.3.2用无菌的镊子夹取分生孢子器置于双层无菌载玻片压碎后，用少量无菌水冲洗，制成孢子悬液。在光学显微镜下使用血球计数板对菌悬液中的孢子进行计数，配成1×107个/mL的孢子悬浮液待用。

6育苗

6.1将试验种子放入10%磷酸三钠溶液，或0.1%高锰酸钾溶液中浸种20分钟后，用清水冲洗4次，放在常温条件下浸种10小时～12小时，然后放在28℃~30℃条件下催芽，每10小时用温水

投洗一次。对照抗病和感病品种种子采取同样方式处理。

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6.2出芽后播种于10cm×10cm装有营养土的营养钵中，营养土采用近五年未种过茄科植物的肥沃园田土6份、草炭土3份，充分腐熟的农家肥1份进行配制，在日光温室内育苗，白天温度25℃~30℃,夜间温度15℃~17℃,其他正常管理，育苗期间不使用任何杀菌剂。

6.3幼苗应生长健壮、整齐一致，待长至5叶期用于苗期接种。

7接种鉴定

7.1接种时期

幼苗4片～6片真叶期进行接种。

7.2接种方法

采用喷雾法接种，用小型喷雾器将配制好的1×107个/mL孢子悬浮液，均匀喷雾到每一片叶的正反面，每株接种孢子悬浮液5mL。每份鉴定材料3次重复，每一重复10株