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第六节动物繁殖控制技术
一、诱发发情
二、同期发情
三、胚胎移植胚胎移植:是指将一头良种母畜配种后的早期胚胎取出,
移植到同种的生理状态相同的母畜体内,使之继续发育成新个体,所以也称作借
腹怀胎。提供胚胎的个体为供体,接受胚胎的个体为受体。胚胎移植实际上是产
生胚胎的供体和养育胚胎的受体分工合作共同繁殖后代的过程。胚胎移植产生的
后代,遗传物质来自供体母畜和与之交配的公畜,而发育所需的营养物质则从养
母(受体)获得,因此供体决定着它的遗传特性(基因型),受体只影响它的体
质发育。
(一)供、受体母畜的选择
1.供体的选择
1)具备遗传优势,在育种上有价值:应选择生产性能高,经济价值大的母
畜作为供体。
2)具有良好的繁殖能力:既往繁殖史正常,易配易孕,没有遗传缺陷,分
娩顺利正常无难产。
3)健康无病:特别是无繁殖疾病和传染性疾病。
4)营养良好,体质健壮。
2.受体的选择
受体母畜可选用非优良品种的个体,但应具有良好的繁殖性能和健康体况,
可选择与供体发情同期的母畜为受体,一般二者发情同步差不超过±24小时。
(二)供体和受体的发情同期化
供、受体的同期化是胚胎移植的关键,只有当供、受体的生殖器官处于相同
的生理状态,移植的胚胎才能正常发育。若不同期,胚胎处于不同生理环境,受
体母畜不能产生促黄体作用,不能分泌足量的孕酮,胚胎就不能附植。一般供受
体同期化发情时间不得超过一天,同期化越近成功率越高。
当前比较理想的同期发情药物是前列腺素及其类似物,其用量根据药物的种
类和用法而有不同,如子宫灌注的剂量要低于肌肉注射的剂量。在注射PGF2α
后24小时,配合注射促进卵泡发育的PMSG或FSH,可明显提高同期发情效果。
(三)供体母畜的超数排卵
1.超数排卵的概念
在母畜发情的适当时间内利用外源性激素,促进卵巢机能,激发卵巢一次有
较多卵泡发育成熟并排卵。
(四)胚胎采集
采胚是指借助工具利用冲胚液将胚胎由生殖道(输卵管或子宫角)中冲出,
并收集在器皿中。胚胎采集有手术法和非手术法两种方法,手术法适用于各种动
物,非手术法仅适用于牛、马等大动物,且只能在胚胎进入子宫后进行。
1.胚胎采集前的准备
(1)冲胚液、培养液的配制
为了保证胚胎在离体条件下不受损伤,冲胚液必须符合一定的渗透压和PH
值。现在多采用杜氏磷酸缓冲液(PBS)、布林斯特氏液、合成输卵管液(SOF)
以及199培养液(TCM199)等,它们除含各种盐类外,还含有多种有机成分,不
但可用于冲洗、采胚,还可用于体外培养、冷冻保存和解冻胚胎等。
冲胚液和培养液在使用前都要加入血清白蛋白,含量一般为0.3-1%,也可
用犊牛血清代替,犊牛血清需加热(56℃水浴30分钟)灭活,使血清中的补体
失去活性,以利胚胎存活。冲胚血清含量一般为3%(1-5%),培养血清含量为20%
(1-50%)。
(2)采胚时间的确定
采胚时间的确定应根据配种时间、发生排卵的大致时间、胚胎的运行速度、
胚胎的发育阶段、畜种、胚胎所处部位、采胚方法等因素来确定。
1.采胚方法
(1)手术法采胚:在沿腹部中线作一切口,找出输卵管和子宫角,引出切
口外,用注射器吸取冲洗液注入输卵管或子宫角内。从另一方向插入塑料细管或
针头,用表皿接取冲洗液,胚胎即随冲洗液一起流出。两侧应分别冲洗。由于子
宫角与输卵管峡部接合处结构上的不同,一般牛羊是将冲洗液从子宫角注入,由
输卵管的伞接取。猪马相反。(2)非手术法采胚:非手术法是利用三路导管的采
胚器瘵冲洗液通过中管注入子宫角内,然后通过内管导出冲洗液,外管前端连接
一气囊,当将采胚器插入子宫角后,充气使气囊胀大,堵住子宫颈内口,以免冲
洗液经子宫颈流出。也可用二路导管采胚器,冲洗液的注入和导出是通过同一导
管。非手术法采胚每侧子宫角用冲洗液100-500ml。
(五)胚胎的检查和鉴定
检查胚胎应在20-25℃的无菌操作室内进行,可采用以下两种方法:一是静
置法——把盛冲胚液的容器静置20-30分钟,因胚胎比重大,会下沉到容器底部,
然后将上面的液体弃去,将下面的几十毫升冲胚胎液倒入平皿,在立体显微镜下
进行检查。二是用带有网格(直径小于胚胎直径)的过滤器放入冲胚液中,由上
而下吸出冲胚液,最后只检查下面的几十毫升冲胚液即可。检出的胚胎
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