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固相萃取-高效液相色谱检测牛肉中四环素类抗生素残留

陈士恩;程燕平;阿依木古丽;霍生东;申晓蓉;刘丽霞

【摘要】利用Waters2695高效液相色谱仪对牛肉中四环素类抗生素残留进行测

定.样品经5%高氯酸溶液提取、C18固相萃取柱净化、旋转浓缩、0.22μm微孔滤

膜过滤,反相色谱分离,紫外检测.色谱柱为WatersNova-parkC18柱(4

μm,3.9mmi.d.×150mm),以磷酸二氢钠溶液-乙腈-甲醇(体积比为70:20:10)为流

动相,流速为0.8mL/min.紫外检测器检测波长为365nm,每次进样10μL.结果是土

霉素、四环素、金霉素的检出限分别为0.0365μg/mL0.0430μg/mL、0.055

8μg/mL,线性范围为0.1μg/mL～-1.0μg/mL.测定54份牛肉样品,只有一份牛肉的

金霉素残留为132μg/kg,高于我国农业部规定的量高允许残留量标准(100μg/kg).

【期刊名称】《西北民族大学学报（自然科学版）》

【年(卷),期】2011(032)001

【总页数】6页(P62-67)

【关键词】牛肉;高效液相色谱;固相萃取;四环素类抗生素;紫外检测

【作者】陈士恩;程燕平;阿依木古丽;霍生东;申晓蓉;刘丽霞

【作者单位】西北民族大学生命科学与工程学院,甘肃兰州,730030;西北民族大学

生命科学与工程学院,甘肃兰州,730030;西北民族大学生命科学与工程学院,甘肃兰

州,730030;西北民族大学生命科学与工程学院,甘肃兰州,730030;西北民族大学生

命科学与工程学院,甘肃兰州,730030;西北民族大学生命科学与工程学院,甘肃兰

州,730030

【正文语种】中文

【中图分类】S851.4

0前言

四环素类药物被广泛用于防治动物感染性疾病,它的毒性主要有二重感染、肝肾及

肠胃反应、可在人和动物骨骼和牙齿中沉积,形成“四环素牙”[1].四环素族抗生素

(Tetracyclineantibiotics,TCs)主要包括土霉素(Oxytetracycline,OTC)、四环素

(Tetracycline,TC)和金霉素(Chlortetracycline,CTC).它是一种广谱抗菌素,对革兰

氏阳性菌、革兰氏阴性菌、立克次体、螺旋体乃至原虫类都有很好的抑制作用.TCs

最明显的残留毒性是诱导耐药菌株产生.

目前,四环素类抗生素残留检测有色谱法、微生物法、ELISA、紫外法、荧光法等.

色谱法又分为高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法(GC)、色谱-质谱联用法(LC-

MS)、薄层层析法等[2,3].本文采用固相萃取-高效液相色谱-紫外检测的方法检测

牛肉中四环素类抗生素残留.

1材料与方法

1.1实验材料

牛肉样品分别采自兰州市张苏滩、西部、桃海、五泉山、白银路、铁路新村、雁滩、

农民巷、南昌路和建兰路等10处农贸市场和大世界百货、华润万家、华联、国芳

百盛、西太华等8处超市.每处随机采集三份,每份约500g,共54份肉样.

甲醇(色谱纯,天津光复精细化工)、乙腈(色谱纯,天津光复精细化工),磷酸二氢钠(分

析纯),5%高氯酸(分析纯),乙醚(分析纯,天津四友精细化学品有限公司),土霉素、金

霉素、四环素(中国药品生物制品检定所,纯度分别为94%、92%、93%).

1.2试验主要仪器

美国Waters2695系列液相色谱仪(配2998型紫外检测器、真空抽滤泵、

G1313A自动进样器,G1311A四元泵、柱温箱及内置Empower数据处理软

件),RE2002旋转蒸发仪(上海羌强仪器有限公司),C18固相萃取装置(Lida公司).

1.3试剂的配制[4]

土霉素(OTC):准确称取土霉素0.0100g,用0.1mol/L盐酸溶液溶解后并定容至

100mL,标准液浓度为0.1mg/mL(先用少量甲醇溶解后再用盐酸溶解).

四环素(TC):准确称取四环素0.0100g,用0.01mL/L盐酸溶液溶解后并定容至

100mL,标准液浓度为0.1mg/mL.

金霉素(CTC):准确称取金霉素0.0200g,用纯净水溶解后并定容至100mL,标准液

浓度为0.2mg/mL,配制后在冰箱中4℃保存,在1周内使用.

0.01mol/L磷酸二氢钠溶液:称取1.560