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新兽药一般毒性试验技术要求

一、急性毒性试验

根据供试药物临床应用的给药途径不同，本试验可分为：

(一)经口或注射给药的急性毒性试验

1、动物

选用小鼠(体重18—22g)、大鼠(180—200g)或其他敏感动物。应注明动物品系。ÿ组小鼠

不少于10只，大鼠不少于6只，雌雄各半，雌性应δ产无孕。

2、供试药物的配制

一般用水为溶剂，将药物配制成一定浓度的溶液。若选择其他溶剂或助溶剂，一般要求

LD5015000mg／kg。

3、给药方式与最大体积

经口急性试验宜用灌θ法，一次剂量直接灌入，给药前需禁食4—8小时，但不限制饮水。

一次最大灌θ量，小鼠不超过1.0ml／只，大鼠不超过4.0ml／只。若灌θ量太大，可在

24小时分成2—3次给药，但合并作为一日剂量计算。经注射急性毒性试验多采用腹腔注射，

一次最大注射量，小鼠不超过1ml，大鼠不超过3ml。

4、剂量与分组

在正式试验前，首先用少量动物做预备试验，确定受试动物全部致死的最小剂量和全部不

致死的最大剂量，正式试验一般分为5—7个剂量组。组间剂量呈等比级数，其比值为

1.2—1.4。

5、观察指标

观察动物一般健康状况，中毒表现和死亡过程。观察时间一般为一周。对死亡动物应作大

体剖检，必要时进行病理组织学检查。

6、LD50计算

采用寇氏或机率单λ对数图解法计算供试药的LD50。值及其95％可信限范Χ。

7、结果评定

大鼠一次经口LD50在1mg/kg以下者为极毒，1—50mg／kg为剧毒，50—500mg／kg为中等

毒，500—5000mg／kg为低毒，5000mg／kg以上者为实际无毒。

(二)经皮给药的急性毒性试验

1、动物

选用健康家兔(2.0—3.0kg)、豚鼠(350—450g)或大鼠(200—300g)。ÿ组动物不少于6只，

雌雄各半。

2、供试药物的配制

供试药物如是固体，应磨成细粉状，过120目筛，并用适量水或无毒无刺激性赋形剂(橄榄

油、羊ë脂、凡士林等)混匀。如为液体，一般不要稀释。

3、给药方式

脱去动物背部脊柱两侧ë发(不得损伤皮肤)，脱ë后24小时检查皮肤，如无损伤才能进行

试验。将供试药物均匀地涂敷于脱ë区，不应少于动物体表面积的10％，用塑料纸和两层

纱布覆盖，再用胶布或绷带固定，以防脱落和动物舔食。敷药24小时。试验结束后，用温

水或适当溶剂清除残留供试药。大鼠可采用浸β方法给药。

4、剂量与分组

正式试验前，用少量动物做预备试验，根据24小时内动物死亡情况，估计LD50的可能范

Χ，以确定正式试验的剂量。一般分为4个剂量组，组间剂量呈等比级数。其比值为：

1.5—3.0。若用赋形剂，需设赋形剂对照组。

5、观察指标

注意观察动物的全身中毒表现和死亡情况。观察时间为一周。若给药4天后仍有动物死亡

时，仍需继续观察一周，对死亡动物应作大体剖检，必要时进行病理组织学检查。

6、结果评定

兔涂皮LD50在5mg/kg以下者为极毒，5—44mg/kg为剧毒，44—350mg/kg为中等毒，

350—2180mg/kg为低毒，2180mg/kg以上者为无毒。

二、亚慢性毒性试验

1、动物

一般选用大鼠(100—200g)或小鼠(15—20g)。有条件时，采用供试药物的靶动物鸡等。外

购动物需饲养一周后才能供试验用。

2、试验周期

根据临床或生产实际用药时间决定试验周期。临床用药期1—3天时，毒性试验给药期为14

天；临床用药期7天时毒性试验给药期为28天；临床用药期30天时，毒性试验给药期为90

天，临床用药期30天以上时毒性试验给药期为6个月。

3、给药方式

如试验周期短(14天)，应与临床应用的给药途径相同，内服时，大、小鼠用灌θ法，鸡

用药丸投予。给药周期28天以上时，则将药物混于饲料中，让其自由采食(应确保给药量

不影响动物正常的营养需要)，饮水不限。

4、剂量与分组

至少三个剂量组和一个对照组，大鼠ÿ剂量组至少20只，雌雄各半。高剂量组应有部分动

物出现毒性反应或死亡(死亡数不超过20％)，低剂量组应高于药物对动物的有效量，原则

上应不出现任何毒性反应。

5、观察指标

(1)ÿ天观察一般健康状况，包括活动、采食、饮水、发病和死亡情况。

(2)ÿ周分别称体重、饲料消耗量2—3次，计算增重、平均摄食量及饲料利用率。

(3)定期作血液学检查：包括血色素含量、红细胞数、白细胞数及其分类计数、血小板数、

网织红细胞数等。

(4)定期有选择地作血液生化学检查：包括谷丙转氨ø