猪流行性腹泻病毒COE基因乳酸菌表达载体的构建与表达研究的开题报告.pdfVIP

猪流行性腹泻病毒COE基因乳酸菌表达载体的构建与表达

研究的开题报告

一、选题背景

猪流行性腹泻病毒（porcineepidemicdiarrheavirus，PEDV）是一种高度传染性

的病毒，能够引起猪的严重腹泻，导致猪群中的高死亡率和严重经济损失。目前，

PEDV疫苗的研发和生产一直是猪养殖业发展的重要领域之一。而乳酸菌是一种安全无

害的微生物，具有良好的生物安全性和免疫调节作用。因此，将PEDV的COE基因与

乳酸菌表达载体结合，构建COE-乳酸菌表达系统，可以用于开发PEDV疫苗，并为研

究PEDV的免疫机制提供新的思路和策略。

二、研究目的

本研究的目的是构建PEDVCOE基因与乳酸菌表达载体的融合系统，实现COE

基因在乳酸菌中的快速高效表达，为PEDV疫苗的研制提供技术支持，同时探讨PEDV

免疫机制的研究方向。

三、研究内容和方法

1.制备PEDVCOE基因和乳酸菌表达载体

根据PEDVCOE基因序列和乳酸菌表达载体的结构，设计COE基因引物和乳酸

菌表达载体的引物，并通过PCR扩增获得COE基因和表达载体的DNA。将COE基因

和表达载体进行连接，构建COE-乳酸菌表达载体。

2.酵母双杂交筛选

将COE-乳酸菌表达载体转化至酵母菌，进行酵母双杂交筛选。筛选出能够与

COE基因相互结合的乳酸菌蛋白并进行鉴定和分析。

3.乳酸菌转化

将COE-乳酸菌表达载体转化至乳酸菌中，利用Westernblot和ELISA技术对

COE蛋白进行检测和分析。并通过比较COE基因和乳酸菌表达COE基因的免疫原性

和免疫保护效果，研究COE-乳酸菌表达系统的疫苗制备价值。

四、研究意义

本研究旨在开发PEDVCOE基因与乳酸菌表达载体的融合表达系统，为PEDV疫

苗的研制提供新思路和技术支持；同时，对于PEDV的免疫机制进行研究，为探讨

PEDV感染和免疫机制提供新的思路和策略，为猪养殖业的健康发展和经济增长做出积

极贡献。