Waters2695高效液相色谱仪操作规程(初稿) .pdf

Waters2695高效液相色谱仪操作规程

1开机前的准备工作

1.1检查设备电源、流路、信号连接是否完好；

1.2流动相：配制相应的流动相，经0.45m微孔滤膜抽真空过滤后，并超声脱气1分钟，

必须使用色谱纯的溶剂，水或缓冲盐溶液要用超纯水；盛放溶液和流动相所用的玻璃容器

必须用超纯水清洗；

1.3样品溶液：按方法取样或配制标准样品溶液，0.45m滤膜过滤。

1.4清洗柱塞密封垫（SealWash）的溶液配制：含5%-10%甲醇或乙腈的超纯水（适用于

反相色谱）；

1.5洗针液（NeedleWash）的配制：50%甲醇：50%水（适用于反相缓冲溶液）；100%甲醇

（适用于反相非缓冲溶液）。

2开机平衡系统

2.1开机自检打开电源开关，仪器开始自检（4-5min），待屏幕上方出现“Idle”自检完

成。

2.2脱气（Degasssger）

按面板右下方“Menu/Status”键进入“Status(1)”界面，移动光标至“DegasserMode”，

按Enter选择“On”，打开在线脱气。一般默认是开的。

2.3设定柱温及样品室温度（可选项）

在“Status”界面，光标至“ColHtrSet”，输入目标温度，按Enter；光标移至“Sample”,

选择目标温度（4℃-40℃），按Enter。（可在工作站方法中设置）

2.4灌注柱塞密封清洗泵（PrimeSealWash）

在主屏幕下，按【Diag】，显示“Diagnosties”屏幕，按【PrimeSealWash】,显

示“PrimeSealWash”屏幕，按【Start】,直到清洗溶剂流出泵杆密封圈冲洗废液管，

按【Hart】、【Close】、【Exit】。

2.5灌洗针头清洗泵（PrimeNeedleWash）

在主屏幕下，按【Diag】，显示“Diagnosties”屏幕，按【PrimeNdlWash】,显示

“PrimeNeedleWash”屏幕，按【Start】,30s内应见溶剂从废液排放口流出，按【Close】、

【Exit】；若想要多清洗几次时，请按StartAgain。

2.6湿灌注（WetPrime）

在“Status(1)”界面中“Composition”下，选择将用到的溶剂通道为“100%”，按

液晶屏幕右下角“DirectFunction”键，移动光标选择“WetPrime”，“OK”，流速及时

间可使用默认值，也可自行设定（如：5ml/min，3min），“OK”即可。

将每一个会用到的溶剂通道按照上述操作一次。（也可各通道选25%5ml/min，3min）。

2.7冲洗进样器（PurgeInjector）

按“Menu/Status”进入”Staus(1)”画面，在设定溶剂画面中设定适当的流速与溶

剂比例（针对缓冲盐或离子对试验，建议设定50%乙腈：50%水的溶剂来清洗进样器），按

“DirectFunction”键，选择“PurgeInjector”，“OK”，默认数值为6，“OK”。

注：以上2.4-2.7为溶剂系统前处理过程，建议每天开机后依次进行。若发现注射器

中有气泡，则可重复2.7直至排除。

2.8平衡柱子在“Status”界面上，按流动相比例设定各通道溶剂比例后，再WetPrime

操作一次，然后设置流速，平衡色谱柱30-60min。（可在工作站中设置）

3编辑仪器方法和方法组

3.1双击Empower，输入用户名system、密码manager选择项目和系统。

3.2新建方法与方法组

新建方法：单击监视区“方法组编辑”向导—新建—2695的参数：压力界限、泵模

式（等度/梯度）、柱温、样品室温度。检测器配置：通用（灯开启、λ范围、分离度1.2nm、

采样频率）—文件—另存为（输入方法名）-保存-退出。

新建方法组：选择所需的方法名称，点击下一步—输入方法组名（与方法名一致）

4进样

4.1待“监视基线”稳定后，点击“中断样品组”开关，进入“进样”阶段；

4.2当进行单进样时，在“运行样品”的“单进样”界面中输入“样品名”“功能”“方法