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超氧阴离子检测试剂盒说明书
可见分光光度法
货号:UPLC-MS-4544
规格:50T/48S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称规格保存条件
提取液液体100mL×1瓶4℃保存
试剂一液体32mL×1瓶4℃保存
试剂二液体25mL×1瓶4℃保存
试剂三液体25mL×1瓶4℃保存
试剂四液体42mL×1瓶(自备)4℃保存
标准品液体1mL×1支4℃保存
溶液的配制:
1、试剂四:自备氯仿;
2、标准品:10μmol/mL亚硝酸钠。
产品说明:
生物体内超氧阴离子等活性氧具有免疫和信号传导的作用,但积累过多时会对细胞膜及生物大分子产生破坏
作用,导致机体细胞和组织代谢异常,从而引起多种疾病。
--
超氧阴离子与盐酸羟胺反应生成NO,NO在对氨基苯磺酰胺和萘乙二胺盐酸盐的作用下,生成紫红色的偶
22
氮化合物,在530nm有特征吸收峰,根据A530值可以计算样本中O-含量。
2
技术指标:
最低检出限:0.00124μmol/mL
线性范围:0.0019-0.25μmol/mL
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者
增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
天平、水浴锅、离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、氯仿和蒸馏水。
操作步骤:
一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
1.植物、动物组织:称取约0.1g样本,加入提取液1mL,充分研磨,12000rpm,4℃,离心20min,取20μL上
清测定蛋白含量,其余上清作为待测样本。
2.血清或培养液:直接测定。
二、测定步骤
1.分光光度计预热30min以上,调节波长至530nm,蒸馏水调零。
本产品仅供科学研究使用!请勿用于临床、诊断、食品、化妆品检测等用途!-上海液质检测技术有限公司
第1页共2页
2.标准溶液的制备
将标准溶液稀释为0.125、0.0625、0.03125、0.015625、0.0078125、0.0039μmol/mL的标准溶液,用这些标准
管做标准曲线。
3.操作表
空白管测定管标准管
标准溶液(mL)0.2
样本(mL)0.2
提取液(mL)0.50.30.3
试剂一(mL)0.40.40.4
混匀,37℃水浴20min
试剂二(mL)0.30.3
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