液质联用测定甘油三酯结构 .pdfVIP

液质联用测定甘油三酯结构

一、

1仪器设备：SFC：超临界液相色谱Q-TOF-MS：飞行时间质谱

2条件：本研究中使用WatersXevoG2-SQ-TOF质谱仪（沃特斯Waters，USA）

与WatersAcquityUltraPerformanceConvergenceChromatography（UPC2，

Waters，USA）联用。SFC系统配备了二元溶剂泵，自动进样器，柱管理器和主

要包含背压调节器的汇流管理器。在1500psi的恒定背压下，在50℃下在Acquity

UPC2BEH-2EP柱（100mm×3.0mm×1.7lm，Waters，USA）上进行分离步骤。

洗脱液A是超临界CO，洗脱剂B是甲醇：乙腈：甲酸（50:50:0.1，v/v/v）

2

的混合溶剂。洗脱梯度基于我们研究组以前的研究，并在本研究中进行了优化：

将0.1％B的等度洗脱保持2分钟，然后洗脱液B的比例在6分钟时线性增加至

1％，在9分钟时增加2％并保持6分钟，之后，在20分钟时线性上升至7％，

24分钟时上升至20％。最后，在0.5分钟内回到初始梯度并保持0.5分钟。运

行期间流速维持在1.0mL/min，注射体积为1.0μL。

Q-TOF质谱仪的优化参数如下：采用m/z50-2000采集范围的MSE采集方法，

采用正离子电喷雾电离（ESI+）模式进行数据采集。脱溶剂气体为气体流量800L

/h的氮气，碰撞气体为氩气。源温度和去溶剂化温度分别为120℃和450℃。

毛细管电压为3.0kV，锥形电压为25V。锥形气体流量为20L/h。低碰撞能量设

定在4eV，而高斜坡碰撞能量设定在20-60eV。亮氨酸脑啡肽（0.4ng/μL）

用作实时校准的内标（每30秒）。

3参考文献中结果如图：

二、

1仪器设备：HPLC-ELSD：高效液相色谱-蒸发光散射检测器

2条件：采用1100系列液相色谱仪（AgilentTechnologies，Waldbronn，Germany），

该仪器配有四元泵、脱气机、恒温柱室，自动采样器和联机到Agilent385-ELSD

的UV-vis二极管阵列检测器。使用KinetexC18100A柱（150mm×4.6mm，2.6

μm;Phenomenex，Torrance，CA，USA）进行分离。优化的分离条件如下：用

80:20乙腈/正戊醇混合物等度洗脱45分钟，然后在20分钟内使乙腈/正戊醇

的比例梯度降低至达60:40；柱温，10℃;流速1.0mL/min;注射量10μL。UV

检测在波长205±10nm（参照360±60nm）进行。ELSD参数如下：蒸发和雾

化温度55℃;气体流量，1.2标准升/分钟（SLM）;增益因子1。

对于TAG识别，通过大气压化学电离（APCI）源将UPLC二元泵系统（Acquity，

Waters，Milford，MA，USA）连接到三重四极杆质谱仪（TQD，Waters，Manchester，

UK）接口上。MS工作条件如下：探头温度600℃;电晕放电电流，20μA;源温

度，120°C;去溶剂气流量800Lh-1;锥形气流，60Lh-1。干燥以及雾化气

体是氮气（Praxair，Valencia，Spain）。质谱仪在m/z150-1000范围内以正

电离模式扫描，每秒扫描一次。

3参考文献中结果如图：

三、

1仪器：

2条件：流动相A为异丙醇:乙腈(9:1，v/v)含10mM甲酸铵、0.1%甲酸，流动

相B为乙腈:水(7:3，v/v)含10mM甲酸铵、0.1%甲酸；选用BEHC18柱(1.7μm，

2.1mmID×100mm，waters)，柱温设为60°C；洗脱条件如下:0min用30%A

洗脱，2min用43%A洗脱,2.1min用50%A洗脱，10min用54%A洗脱，11min

用30%A洗脱并维持1min，流速为0.4mL/min。

质谱条件

4500QTra