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液相色谱仪操作流程 .pdfVIP

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岛津液相色谱仪操作流程(LC16)

单泵4泵头

1.准备流动相

1.1、甲醇、高纯水(或二次蒸馏水),分别用有机系和水系0.45vm滤膜抽滤,超声

波15-20min,更换流动相。或者根据实验方法选择流动相。

1.2、注意:切勿让水系滤膜接触到有机相,会发生溶解。

2.根据方法文件选择换上合适的色谱柱。(注意色谱柱的方向)

2.开机及排气泡

2.1、接通电源,依次开启泵、检测器、Lcsolution工作站。

2.2排气泡

2.21、通过软件设置冲洗条件。

开启LC系统后,启动【LC实时分析】工作站后,确保分析仪器的所有单元(泵、

柱温箱和检测器)都已连至系统控制器。确保所有单元上都没有显示任何错误消息。

打开spd新建方法文件常规低压梯度洗脱根据需要设置

需要冲洗的泵头(例:只冲洗泵A,设等度洗脱即可。同时冲洗泵A、泵B,则选择

低压梯度洗脱,泵B设50%。)下载。

2.22、然后将排液阀旋钮逆时针旋转180°,以打开排液阀,按“Purge”键运行,开始

冲洗。等待仪器,自动结束冲洗程序。关闭排液阀。

3.设置仪器参数:

3.1【新建方法文件】:根据实验方法,可以在其中输入分析条件,

流速、波长、流动相配比(如果是单泵单泵头,需手动配制流动相。多泵头可根

据流动相配比设置百分比)、柱温(若实验方法未注明则是室温,柱温箱可设25

摄氏度,若室内有温控可关闭柱温箱选项)、LC停止时间(未知保留时间表样,

或复杂成分样品,选最大时间,或出现目标峰后基线平稳,无杂峰的最小时间)。

3.2设置好实验条件后,单击下载“”将设置传输到仪器,使用新名称保存方法

文件。

3.3设置进样信息:确保显示【就绪】,且【色谱图视图】中的基线稳定后

(一般约需15~30分钟)。单击【LC实时分析】窗口助手栏上的单次“运行”图

标,出现单次“运行”屏幕,设置样品名、样品ID、数据文件、数据描述、进样体

积等,然后单击【确定】。

3.4检测器调零:点击检测器“A零点”图标,使检测器数值调零。等基线、压力稳

定后可进样。

3.5进样:

3.51吸取不少于60μl的样品(定量阀为25vl,进样体积为定量阀体

积的2-3倍),放在进样口,向左打开进样阀,将样品全部打入进样口,

向右打下进样阀,系统即自动开始采集数据。单次分析开始,并且【LC

实时分析】窗口中的状态从【就绪】变为【运行】。

3.52当达到【仪器参数视图】中指定的检测器的【结束时间】时,

自动终止数据采集。

3.53如设定的【结束时间】要修改,可以单击【采集】助手栏中的

【停止】图标,也可以在【数据采集】菜单的【更改分析时间】项目中,

在数据采集过程更改结束时间。一旦开始数据采集,【仪器参数视图】设

置变为只读,并且不能在【仪器参数视图】中更改结束时间。

4.数据处理

4.1单击Lcsolution“16c”中的“再解析”,LC“再解析”开始。

4.12选择【文件】菜单中的“选择项目文件夹”,然后选择预测定的数据

文件,数据文件即打开。

4.13单击助手栏中的【向导】图标,单击program“”点击【下一步】,设

置正确的积分参数。

4.14记录要识别的峰的保留时间,单击【下一步】输入所需峰的详细内容,

然后单击【完成】。单击化合物表右上角【视图】按钮,查看【结果】。

4.15单击【LC数据】助手栏中的【应用到方法】图标,出现屏幕,提示指

定方法文件名。命名方法文件并单击【保存】。

5.打印报告:在【LC数据分析】点击左下角的【报告格式】出现操作人“

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