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第三章
核酸;DNA碱基顺序的测定
RNA碱基顺序的测定;DNA碱基顺序测定的基本步骤;DNA片断的制备;杂交测序法
质谱法
单分子测序法
原子探针显微镜测序法
DNA芯片法;一、以化学裂解反应为基础—化学降解法;化学裂解法测定DNA的核苷酸序列;二、以使用DNA聚合酶为基础--DNA链末端终止法;1977年sanger发明末端终止法
“加减法”
Sanger双脱氧终止法
DNA酶法测序
DNA自动测序仪
;1、“加减法”测定DNA序列的原理;*;2、双脱氧链终止法;3、DNA酶法测序;DNA酶法测序;三、DNA自动测序;第一步加入复制终止剂;ddNTPs参与下的DNA复制;第二步荧光检测;DNA自动测序结果;RNA碱基顺序测定方法;应用一套已知序列的寡核苷酸探针去寻找靶DNA链上的互补序列，靶DNA上的序列根据杂交情况来确定。;一、化学正在向生命科学领域渗透。;正在发展的几种测序方法;核酸分子的核苷酸序列分析是以纯品核酸为材料，经水解，测定核苷酸组成及比例；
先以外切酶确定5′-或3′-末端核苷酸，再以内切酶将核酸链分为若干寡核苷酸段，分段测定核苷酸组成、比例和序列；
最后将核苷酸序列的各寡核苷酸重叠，确定整个核酸分子的核苷酸序列。;酶;第五节
核酸的催化性质
Thecatalyticpropertiesofnucleicacids;核酶（Ribozyme）;核酶的发现;核酶;核酶的催化性质;核酶的催化过程图;核酸酶是指所有可以水解核酸的酶
依据底物不同分类
DNA酶(deoxyribonuclease,DNase)
RNA酶(ribonuclease,RNase)
依据切割部位不同分类
核酸内切酶：
限制性核酸内切酶
非特异性核酸内切酶
核酸外切酶：
5′→3′或3′→5′核酸外切酶。;参与DNA的合成与修复及RNA合成后的剪接等重要基因复制和基因表达过程
负责清除多余的、结构和功能异常的核酸，同时也可以清除侵入细胞的外源性核酸
在消化液中降解食物中的核酸以利吸收
体外重组DNA技术中的重要工具酶;ThecrystalstructureoftheL1ligaseribozyme.(Credit:M.RobertsonandW.Scott(Science,March16,2007);X射线衍射技术确定核酶晶体结构;核酶催化效率太低
由于核酶本身是RNA，很容易被核酸水解酶(RNase)所破坏
因此，要将核酶应用于体内阻断基??表达或作为抗病毒的临床药物，还要做大量的研究工作。
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