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兔球虫病诊断方法兔球虫病防控的研究进展

-养兔技术

兔球虫病是一种常见的寄生虫病，目前尚未研制出兔球虫疫苗，

国内外防治兔球虫病的主要方法仍然是应用抗球虫药。南于兔球虫对

各种化学性抗虫药很容易产生抗药性，且不同地区球虫株之间存在差

异，患兔生长发育受阻，体重可减轻12％～29％，死亡率高达80％以

上，造成经济损失大。下面具体来了解一下：兔球虫病诊断方法兔球

虫病防控的研究进展。1、常规诊断实验室诊断一般根据季节因素、环

境、年龄、临床症状和病理剖检后的典型病变可进行初步诊断。确诊

需进行实验室检查，常用饱和食盐水浮集法和直接抹片法对粪便进行

检查，值得注意的是，当患急性兔球虫病时，粪便检查往往会看不到

卵囊，则必须进行病例剖解。可取肝脏和小肠坏死灶，进行镜检，观

察是否有椭圆形卵囊或透明的呈香蕉型的裂殖子，如发现即可确诊为

球虫病。如果要确诊感染球虫的种类，还需对球虫卵囊的寄生部位、

孢子化时间、孢子化卵囊的大小、形态结构以及潜隐和致病性等特征

进行研究，有时还需进行人工感染动物实验来确诊。在11种公认的兔

球虫中，只有斯氏艾美耳球虫寄生在肝脏，具有高致病性，潜伏期为

14天；黄艾美耳球虫和梨形艾美耳球虫寄生在大肠，其中黄艾美耳球

虫寄生在盲肠近端和结肠，属于高致病性，梨形艾美耳球虫寄生在结

肠，属于中度致病性，这两种球虫潜伏期均为9天；剩下八种分别寄

生在小肠的结肠段、空肠、回肠、十二指肠以及肠道相关淋巴组织处，

只有肠艾美耳球虫具有高致病性，潜伏期4.5-10天不等。2、分子生

物学诊断Fernandez等人通过一组序列特征扩增区域标记技术作为艾

美耳球虫属的特异性鉴定。Carvalho等人用20个卵囊就能准确的鉴

定7种主要感染的艾美尔球。PCR作为常规的诊断技术可以有效的检

测畜禽中艾美耳球虫的波动，对预防寄生虫方面减少了不必要的工作。

Myung-JoYou采用多重PCR扩增ITS1序列，对柔嫩艾美耳球虫、堆形

艾美耳球虫、巨型艾美耳球虫和毒害艾美耳球虫进行诊断，仅Spg的

DNA进行多重PCR就可以对艾美耳球虫属的球虫进行检测，因此多重

ITS-PCR方法敏感度较高，只需要很少量的DNA样本即可。Yan等人对

6种兔艾美耳球虫ITS进行扩增，并且应用多重PCR诊断方法，区分

了三种高致病性艾美耳球虫。Oliveira等设计出11种兔艾美耳球虫

的ITS1序列特异性引物，采用套式PCR方法，仅用500fg到1pg即能

扩增出特性行条带[7]。Khaled等人采用ITSlPCR扩增对兔艾美耳

球虫感染进行早期诊断，结果显示，在感染球虫第15天，肝脏显示不

规则黄白色病变，肠道上皮组织病理切片可以看见不同的裂殖体和配

子体；第20-24天出现肝肿大和肝腹水病变；在感染的第12天肝组织

PCR呈阳性，粪便样品是第18天呈阳性，血液样品呈阴性。PCR可以

用来作为艾美耳球虫病的早期诊断方法，也可以在粪便卵囊脱落前检

测到裂殖体。分子生物学鉴定是一种准确、有效的早期诊断球虫病的

方法。普通PCR方法可以有效鉴定7种主要球虫，并且只需要20个卵

囊即可，而且操作简单、成本低，但是需要纯化才能测序，易出现假

阳性。套式PCR单个卵囊即可检出，该方法敏感性好、特异性高，可

以有效检测兔球虫的感染情况，但套式PCR方法费时，而且也易出现

假阳性。而且PCR方法还可以作为兔球虫早期诊断的方法，可以在球

虫对兔肝脏造成影响前做出有效诊断。很多病原检测采用到环介导等

温扩增(LAMP)方法，LAMP方法特异性强、等温条件下灵敏度高、操作

简单、易检测等特点，Christopher等采用LAMP方法对鸡球虫感染进

行特异性检测，兔球虫未见用相关LAMP检查方法，但可以借鉴鸡球虫

相关报道。3、展望兔球虫病对养兔业危害严重，关于球虫方面的研究

也从未停止过。球虫感染多为混合感染，不同的艾美耳球虫潜伏期和

感染部位不同，其危害也不相同。准确的诊断患病动物感染哪种球虫

病，最好可以在未对动物造成严重伤害前做出早期诊断，可以更有效

的控制球虫病。迄今为止，对球虫的防控研究主要还是集中在药物方

面，但是球虫极易对药物产生耐药性，也会有药物残留问题。因此对

球虫病早期分子生物学诊断的相关研究应该加强、深入，可以为兔球

虫病的防控提供高效的方法，从而更好的控制球虫病。兔球虫病临床

症状根据球虫的寄生部位可分为肠型