岛津LC-20AT型高效液相色谱仪操作规程 .pdf

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岛津LC-20AT型高效液相色谱仪操作规程

一．系统配置

系统组成：本系统由DGU-20A3脱气机、2个LC-20AT溶剂输送泵（分为A，

B泵）、7725i手动进样器、色谱柱（2个C18柱，3个手性柱）、SPD-20A紫

外-可见检测器、LCSolution（Version.1.2）中文工作站等组成。

二．准备工作

1．流动相准备：使用前按待检测样品的检验方法准备所需的流动相（水使用蒸

馏水，其他有机溶剂要求色谱纯，无机盐缓冲液浓度一般低于20mmol/L）用

合适的0.45μm滤膜过滤（有机相和水相分别选用各自的专用滤膜，水相使用

前必须过滤，有机相用肉眼观察有颗粒时必须过滤）。

2．色谱柱准备：根据待检测样品的需要选用合适色谱柱，柱进出口方向应与流

动相流向一致（检查柱上“FLOW”流向）。

3．样品溶液配置：配置样品和标准溶液，用合适0.45μm的样品过滤器过滤后待

用。如检测中发现检测峰拖尾严重，可稀释后使用。严禁使用未经处理的浑

浊溶液进样。

4．检查仪器各种部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。

三．开机、参数设定及平衡系统

1．开机：接通电源，依次开启B泵、A泵、检测器，待泵和检测器自检结束后

打开电脑显示器、主机，启动工作站软件。

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2．排气泡或更换流动相的操作方法

1）将A/B管路的吸滤器放入装有准备好的流动相的储液瓶中；

o

2）逆时针转动A/B泵的排液阀180；

3）按A/B泵的【purge】键，pump指示灯亮，泵大约以9.9ml/min的流速冲洗，

3min（可设定）后自动停止；

4）将排液阀顺时针旋转到底，关闭排液阀。

5）如管路中仍有气泡，则重复以上操作直至气泡排尽。

6）如按以上方法不能排尽气泡，从色谱柱入口处拆下连接管，放入废液瓶

中设流速为5ml/min冲洗3分钟，停泵后重新接上色谱柱并将流速重新设

定为规定值。

3．参数设定

1）波长设定：一般设为254nm。

2）流动相设定：流速开始不宜太高应为正常分析流速的50％～80％冲洗一段

时间，等待柱压平稳后可调节到正常流速（调节流速时应该每次增减

0.1ml/min，不宜调节过快，柱在线时流速一般不超过1ml/min）。流动相

比例设为初始比例冲洗柱子，等待基线平衡。

4．平衡系统和色谱柱

1）在工作站操作软件上设定各项方法参数，系统至少需要平衡0.5h，色

谱柱需冲洗至基线平稳。

2）等度洗脱方式

○6

1用检验方法规定的流动相冲洗系统，一般最少需倍柱体积的流动相。

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○

2检查各管路连接处是否漏夜，如漏夜应予以排除。

○

3观察泵控制屏幕上的压力值，压力波动应不超过1MPa。如超过则可

判断为柱前管路仍有气泡，进行气泡排除操作

○0.1mV/min

4观察基线变化。如果冲洗至基线漂移时，可认为系统已经达到

平衡状态，可以进样。

3）梯度洗脱方式

○

1以检查方法规定的梯度初始条件平衡系统。

○