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GPC操作步骤

1.操作前预备

1.1.标样及样品的配制

1.1.1.在分析前一天称好必然重量的标样和样品，置于样品瓶中，加入流动相，室温放置

12-24小时。通常将2个相差大的分子量标样配在一路。一样校准曲线有8个不同

分子量，总共4个标样。

1.1.2.利用前缓慢水平摇动样品瓶，使样品浓度均匀，且瓶壁无气泡。

提示：配制标样应该严格依照标样的说明书来操作。严禁超声和加热。标样的浓度应该选在

适合的范围，通常依照分子量来确信。标样的有效期请参考说明书。

1.2.流动相的预备

1.2.1.利用色谱纯级溶剂和超纯水来配制流动相。滤膜过滤后，超声脱气。

提示：超声15min，恢复到室温后才可利用。

2.分析操作步骤

2.1.开机及平稳进程

2.1.1.打开空调，使室内温度维持在25℃左右。

2.1.2.打开电脑及仪器（包括输液泵LC-20AD、自动进样器SIL-20A、检测器RID-10A、柱

温箱CTO-20A）。

提示：在打开仪器的时候，通常操纵器最后开。若是操纵器装在输液泵内部，那么该输液泵

最后开。

2.1.3.运行LCsolution。

双击电脑桌面，打开LCsolution程序，点击第一个图标。

Login窗口点击OK，无密码。

2.1.4.点击“InstrumentParametersView”中“Normal”，设定方式参数。

仪器参数窗口设定方式参数：

流动相流速（pumpaflow）：1ml/min

测按时刻（time）：大于溶剂峰出峰时刻2-3min

柱温（oventemperature）：40℃（与检测器温度相同）

选中Advanced窗口，pump，pressure：max：8mPa（参照柱子说明书，两根柱子串联

那么相加）

点击Download按钮，显现对话框选择是，将参数下载到仪器。

提示：“InstrumentParametersView”中“Advanced”为各设备的运行参数，参考

相关说明书制定。

2.1.5.输液泵排气：逆时针拧开LC-20AD排液阀，按purge按钮，3min后自动终止，顺时

针拧紧排气阀。

提示：排液阀拧开不要超过180度，不然反而容易在purge时引入气泡。

2.1.6.进样器冲洗：按自动进样器上purge按钮，25min后自动终止；

提示：自动进样器清洗液利用与流动相相同溶剂，可是去除添加的盐和酸等物质。

2.1.7.平稳GPC柱：待终止后，按（InstrumentOn/Off）使仪器依照方式参数开始运转，

一样60min左右基线能够走平。

提示：能够与步同时进行。

2.1.8.示差检测器平稳

2.1.8.1.按Rflowon/off键冲洗参比池。

2.1.8.2.20min后，按Rflowon/off键停止冲洗，反复点击3-4次以排除池内气泡。

2.1.8.3.调零，等基线平稳后检查balance值，若是大于50，就进行光路平稳，若是小于

50，没必要进行。

2.1.8.4.在仪器监视窗口查看检测器能量应处于6000和9000之间，不然在面板上调剂电压

使之座落在该范围内。

提示：能够在步流动相完全置换色谱柱中溶液后开始进行。

2.1.9.待基线大体稳固，按ZerosDetectorA键调零。

2.2.分析操作进程

2.2.1.放入样品瓶，记录放置孔号。

提示：样品架应推倒底，瓶垫应该白色朝上。

2.2.2.编辑批处置表

2.2.2.1.右边助手烂点击“Batchprocessing”

2.2.2.2.New；

2.2.2.3.输入第一个样品进样器孔号（Vial#），右键filldetail；

2.2.2.4.跳出窗口中依次填入行数（由第1行到第6行）、第一个样品孔号（2）与重复次数

（1次）；点击“OK”；

2.2.2.5.依次输入samplename（样品名）、sampleID（样品编号）；

2.2.2.6.methodfile列中输入方式文件（*.lcm文件），左键选定列，右键单击