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定西浆水微生物污染调查和乳酸菌的初步鉴
定
作者:陈亚军孙梓轩王文莉
来源:《食品界》2022年第02期
以定西漿水为研究材料,用GB4789系列微生物检验标准检测浆水中的微生物,并采用稀
释涂布法分离筛选浆水中的乳酸菌群,利用生理生化反应初步鉴定其种属。结果在定西浆水中
共检测出蜡样芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌和2种致病微生物,并从定西浆水中初步鉴定乳酸菌
分属于乳杆菌属Lactobacillus、明串珠菌属Leuconostoc和片球菌属Pediococcus,说明定西浆
水的应用潜力巨大,但致病菌的检出说明浆水有受微生物污染的潜在风险。
浆水是用粮食、蔬菜等混合后发酵而成的酸味地方特色食品,是西北的一道独特传统美
食,因其制作简单、原料亲民、成本低廉而深受北方尤其是山西、陕西、甘肃、宁夏等地人民
的喜欢。已有研究表明,浆水中含有大量微生物,乳酸菌、醋酸菌和酵母菌是浆水发酵过程中
的主要菌群,其中尤以兼性厌氧乳酸菌为主要优势菌群,且大部分乳酸菌具有一定的益生活
性,但是由于消费区域性限制以及浆水制作和存储的不确定性因素较多,使得目前浆水主要以
家庭制作为主,发酵质量和卫生状况无法得到有效保障,这也是阻碍浆水向规范化和标准化生
产的主要因素。目前研究较多的甘肃浆水是天水浆水和兰州浆水,且研究内容大多集中在对其
中的乳酸菌进行分离鉴定和特性研究,很少从食品安全角度出发,检测浆水中的微生物污染状
况。本研究将以定西市不同县区的市售浆水为研究对象,以GB4789食品微生物检验系列标准
为依据,分析浆水的食品卫生状况,并对其发酵过程中的乳酸菌进行初步分离,为定西浆水的
规范化生产加工提供技术支持,并为定西浆水中乳酸菌的进一步分析研究提供理论基础。
材料和方法1.
样品与试剂1.1
1.1.1样品采集
从甘肃省定西市各县区的不同场所取样已经发酵完好、正常销售的浆水样品,无菌采集至
无菌袋后低温运输至实验室进行益生菌的分离筛选,共采集样品40份。
1.1.2培养基和试剂
NaCl、Na2HPO4、KH2PO4(分析纯):国药集团化学试剂有限公司;MRS(ManRogosa
Sharpe)培养基、MC(ModifiedChalmers)培养基:北京陆桥生物科技有限公司。
仪器与设备1.2
SPX-350B智能型生化培养箱:上海琅试验设备有限公司;MLS-3781L-P立式高压灭菌器:
松下健康医疗器械(上海)有限公司;EX-30显微镜:宁波舜宇;C-1厌氧培养罐、厌氧产气袋:
日本三菱。
方法1.3
1.3.1浆水中微生物的检测项目、检测方法和标准
定西浆水中微生物的检测项目见表1,检测方法按照食品安全国家标准食品微生物学检验
(GB4789)标准执行。
1.3.2浆水中乳酸菌的初步分离
用生理盐水稀释浆水样品,并选取适宜稀释度的样品菌液涂布于MRS和MC培养基中,
36℃培养72h,其中MRS进行厌氧和好氧培养。培养结束后,观察并记录培养基上不同菌落
的形状、大小、颜色、光滑度、边缘形状等形态特征,挑取不同形态的单菌落进行进一步纯化
培养和染色镜检。
1.3.3菌株的生理生化鉴定
将菌株纯化培养后,进行常规的生理生化鉴定,生理生化项目有:硝酸盐还原实验、明胶
水解实验、酪蛋白分解实验、硫化氢产生实验、MR-VP实验、触酶实验、糖发酵实验(葡萄
糖、核糖、果糖、木糖),记录各生理生化结果。
结果2.与分析
定西浆水中大肠菌群和食源性致病菌检测结果2.1
本次共抽取定西地区浆水样本40份,共检出食源性致病菌10株,包括9株蜡样芽孢杆
菌,检出率为22.5%;1株金黄色葡萄球菌,检出率为2.50%;大肠菌群、沙门氏菌、李斯特氏
菌、副溶血性弧菌均未检出,检测结果见表2。
本次检测中的蜡样芽孢杆菌检出率最高,其为条件致病菌,主要通过产生毒素、溶血素等
物质从而有引起食源性疾病的风险。目前认为该菌含量高于105CFU/g(mL)是引起食物中毒
的诊断标准。本次蜡样芽孢杆菌的检出值均小于103CFU/mL,低于引起食物中毒的限量要
求,但是也有相关报道,蜡样芽孢杆菌在103CFU/g(mL)的含菌量下依然有引发感染的可能
性,因此不能忽视由该菌污染导致的食品安全问题。金黄色葡萄球
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