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液相色谱质谱操作步骤

开机

1.将废气管放入窗外；

2.将氮气罐拧开（氮气总压不能低于2MPa）,氮气时候足够，注意氮气分压表压

力大概在0.6MP左右；

3.打开电脑，进行自检；

4.打开液相自动进样器，自检后绿灯亮即可完成自检；

5.打开泵电源

6.接着打开质谱，自检3分钟，听见两次声响后自检成功；

7.打开masslynx软件后，抽真空4小时左右，直到真空值为e-5次方，即可使

用；

调谐

1.抽好真空后，准备调谐；

2.建立个人“Project”：在Masslynx界面点File-Projectwizard点yes，输

入名称，选择建立新的Project；

3.进行质谱调谐。在TQDetector软件中单击API加氮气，然后调源温度（参考

80），去溶剂温度（参考300），点击软件右下角I图标加电压。等到温度升到

设定值后，在Fluidics中设定参数，调谐前，FLOWSTATE先选择waste对管

路进行清洗（单击purgetheFluidicssystem）；清洗完毕后，FLOWSTATE

中选择infusion，在Analyser中设定参数：如果选择单MS则参数为15，15，

1，Entrance50，Collision2，Exit50，并在软件右侧选择母离子扫描，点

击start进行调谐，改变cone的电压值，使选择的峰信号达到最高，即达到

最优值；若果选择MS-MS扫描，要先打开氩气，参数为13，13，0.5，Entrance

-2，Collision-2，Exit2，点击start进行调谐，点statusinfusion出现

信号，选择子离子扫描，固定corn的电压值，改变collision，使目标峰达

到最高即达到最优值。达到最优值后进行采集，改变DATA和MASSES参数打

开一个色谱图，点小闹钟，在出现的色谱图上点鼠标左键水平向右拖动鼠标，

可得到采集母离子或者子离子信息。要进行下次采集时先关闭上次采集。保存

好调谐方法到个人的Project中；

4.调谐完毕后用溶剂清洗管路，在Fluidics中设定FLOWSTATE择waste，点击

purgetheFluidicssystem，设流速放空洗液。洗完后先关电压（右下角圆

环），降温，温度下降到设定值后关闭氮气；

方法编辑及测定

1.分别点击inletmethod和massmethod编液相和质谱的方法。编好后分别将

该文件存到Project中；（注意：液相时间应与质谱时间一致）

2.编辑样品序列：先建立个人“project”，在最初的界面instrument中输入样

品名，瓶号，进样量，然后分别调出液相方法与质谱方法；

3.在操作平台中打开massconsole，在Acquityuplcsysytem中选择control

下拉菜单中startupsystem选择A（纯有机相），B(纯水相)流动相进行系统

清洗（一般清洗4个循环，流速8ml/min大约10分钟）；

4.做样前，一般设定0.1ml/min流速平衡色谱柱及系统，先用建好的液相方法平

衡柱子，在点Inletmethod，界面中选LC-LoadMethod，观察Delta值小于

50方可开始测试样品（若使用缓冲盐则应小于10）。选中序列中要进的样，点

击start出现startlist，（选from—to—）确定后开始走样。可点击谱图进

行观测，点时钟进行时时观测；

5.测样完成之后，先去电压（TQDetector中右下角圆圈），等源温度和脱溶气

温度都降到100度以下时单击API去氮气。（注意：一定要先去电压，在去氮

气）然后在massconsole中将流量改为0；

6.冲洗色谱柱：根据测试过程流动相选择用不同比例的有机相/水相冲