液相色谱作业指导书 .pdfVIP

1．适用范围：本规程适用于配有此外-可见光检测器，二极管阵列检测器，

荧光检测器各示差折光率检测器的液相色谱。

2．检定依据：JJG705-2014

操作方法

3．打开电脑，打开主机、预热。进入仪器工作站，联机并设定仪器使用方

法及仪器参数，启动泵的动力系统预处理（排气等）。检查是否漏夜、柱压是

否正常。按要求设定流量，启动仪器，压力稳定后，在流动相出口外用事先清

洗称重过的容量瓶收集流动相，同时用秒表计时，用公式计算出泵流量设定值误

差和流量稳定性误差。然后进行梯度误差的检定。

4．柱温箱温度设定值误差和控温故知新稳定性的检定：将数字温度计探头固

定在柱箱内选择35℃和45℃进行检定，待温度稳定后，记下温度计读数并开始

计时，以后每隔10分钟记一次，共7次，求平均值，平均值与设定值之差为设

定值误差，7次中最大值与最小值之差为控温稳定性。

5．紫外-可见光检测器和二极管阵列检测器的检定：

5．1波长示值误差和重复性的检定`：将检测器和记录仪接好，通电预热稳

定后，用注射器将紫外波长标准溶液从检测器入口注入样品池中冲冼，并将池充

满。将检测器波长调到低于标准波长5nm，处记录纸速调到2-4cm/min,记录笔调

到记录纸中间，启动记录仪，记录笔画出一条直线。调检测器波长，每5-10s,

改变1nm,记录仪将画出折线，折线的最高点对应的波长与溶液波长之差为波长

的示值误差每个波长测量3次，其中最大值与最小值之差为波长重复性误差。

5．2基线噪声和基线漂移的检定：选取C18色谱柱，以100%甲醇为流动相，

流量为1.0ml/min,紫外线检测器的波长选取在254nm，检测灵敏度调到最灵敏

挡，记录纸速为5-10nm/min.等仪器稳定后，记录基线30min,由检测器的衰减倍

数和测得的基线峰峰高对应的记录仪标度，计算基线噪声。基线漂移用1小时

内基线偏开原点的值表示。

-7

5.3最小检测浓度的检定:用微量注射器从进样口注入10-20ul1*10g/ml的

萘/甲醇溶液,记录色谱图,由色谱峰高和基线噪声峰-峰高计算最小检测浓度.

5.4线性范围的检定:将检测器和记录仪连接好,检测器波长选在254nm通电

后,用注射器直接向检测池中注射2%异丙醇/水溶液冲洗检测池,并记下和各溶

液的对应的稳定记录仪读数,每个溶液重复测量3次,取算术平均值.以5个丙酮

含量和对应的记录仪读数做标准曲线,在曲线上找出丙酮含量大于0.5%各点的

读数,与对应含量的测量值做比对,测量值低于读数5%时,认为曲线弯曲,此点拭

目以待浓度作为检测上限,用公式算出检测器的线性范围.

5.5灵敏度换挡误差的检定:将记录笔调到记录纸中间,纸速调到2-4cm/min,

等基线平稳后依次改变灵敏度挡位,记录纸上画出相应的折线,重复测量3次,量

出每两挡对应的记录曲线距离,取算术平均值,计算出相邻两面挡的误差,取最大

值为抵换挡误差.

6检定结果

6.1按照本规程，全部检定项目达到技术要求的仪器为合格仪器，发给检定

证书。

6.2只配一个检测器的仪器，任何一个项目部合格，该仪器为不合格仪器，

发给检定结果通知书，注明不合格。

6.3配一个以上检测器的仪器，制药其中一个检测器的检定项目和除检测器

外的其他检定项目合格，可发给配该检测器的仪器的检定证书，同时注明其他不

合格的检测器，限制使用。

7、检定周期

7.1仪器的检定周期一般不超过2年，更换重要部件或对仪器性能有影响时，

应重新检定。