液相色谱仪使用及维护方法 液相色谱操作规程 .pdfVIP

液相色谱仪使用及维护方法液相色谱操作规

程

液相色谱仪使用时要特别的注意：使用卡套柱时，两端的卡

套应时刻连接在柱芯上。不管您是平衡色谱柱或是清洗，任何时候

都不能将卡套取下来，否则会造成填料的流失。液相色谱柱使用注

意：A．卡套柱的

液相色谱仪使用时要特别的注意：

使用卡套柱时，两端的卡套应时刻连接在柱芯上。不管您是

平衡色谱柱或是清洗，任何时候都不能将卡套取下来，否则会造成

填料的流失。

液相色谱柱使用注意：

A．卡套柱的安装（加预柱）

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1．将卡套架套入柱芯

2．将两片夹套片嵌入柱芯的凹槽，使夹套高于柱芯

3．将已套到柱芯上的卡套架向上推，直至高过夹套片

4．将子弹头预柱放入卡套片内

5．将卡套帽和卡套架旋在一起，然后用手拧紧

6．然后依同样的次序连接好柱子的另一端

B．平衡色谱柱

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反相色谱柱在经过出厂测试后是保存在乙腈/水中的。请确

定确保您所使用的流动相和乙腈/水互溶。由于色谱柱在储存或运输

过程中可能会干掉，因此在用流动相分析样品之前，应使用10－20

倍柱体积的甲醇或乙腈平衡色谱柱；假如您所使用的流动相中含有

缓冲盐，应注意用纯水过渡。

硅胶柱或极性色谱柱在经过出厂测试后是保存在正庚烷中的。

假如该色谱柱需要使用含水的流动相，请在使用流动相之前用乙醇

或异丙醇平衡

如何平衡色谱柱？

平衡过程中，将流速缓慢地提高用流动相平衡色谱柱直到获

得稳定的基线（缓冲盐或离子对试剂度假如较低，则需要较长的时

间来平衡）

色谱柱的再生

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进行色谱柱再生时，应使用一个谦价的泵，我们建议可以不

使用您的高效液相色谱仪上的泵。

注意：

在对NH2改性的色谱柱进行再生时，由于NH2可能成铵根离

子的形式存在，因此应当在水洗后用0.1M的氨水冲洗，然后再用水

冲洗至碱溶液完全流出。假如简单的有机溶剂/水的处理不能够完

全洗去硅胶表面吸附的杂质，用0.05M稀硫酸冲洗特别有效。

色谱柱的维护:

1．使用预柱保护分析柱（硅胶在极性流动相/离子性流动相中

有确定的溶解度）

2．大多数反相色谱柱的pH稳定范围是2－7.5，尽量不超过该

色谱柱的pH范围

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3．避开流动相构成及极性的猛烈变化

4．流动相使用前必需经脱气和过滤处理

5．假如使用极性或离子性的缓冲溶液作流动相，应在试验完毕

柱子冲洗干净，并保存大乙腈中

6．压力上升是需要更换预柱的信号

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故障1流动相内有气泡，关闭泵，打开泄压阀，打开PURGE键，

清洗脱气,气泡不断的从过滤器冒出,进入流动相,无论打开

PURGE键几次，都无法清除不断产生的气泡.原因过滤器长期沉浸于

乙酸故障1流动相内有气泡，关闭泵，打开泄压阀，打开PURGE

键，清洗脱气,气泡不断的从过滤器冒出,进入流动相,无论打

开PURGE键几次，都无法清除不断产生的气泡.

原因过滤器长期沉浸于乙酸铵等缓冲液内,过滤器内部由于霉

菌的生长繁殖,形成菌团堵塞了过滤器,缓冲液难以流畅的通过过

滤器,空气在泵的压力下经过过滤器进入流动相.

处理过滤器浸泡在5