超高效液相色谱—串联质谱法检测鸡血液样品中喹诺酮类药物残留.pdf

超高效液相色谱—串联质谱法检测鸡血液样品中喹诺酮类药

物残留

刘瑜;毕孝瑞;张彤;姜玲玲;金雁;徐宜宏;李晓东;耿庆华

【期刊名称】《《畜牧与饲料科学》》

【年(卷),期】2019(040)011

【总页数】4页(P13-16)

【关键词】鸡血液;喹诺酮类药物;超高效液相色谱—串联质谱

【作者】刘瑜;毕孝瑞;张彤;姜玲玲;金雁;徐宜宏;李晓东;耿庆华

【作者单位】沈阳海关技术中心辽宁沈阳110016

【正文语种】中文

【中图分类】S859.84

畜禽产品是人们日常生活中最重要的消费品之一。人们逐渐认识到食品安全与身体

健康的重要性，因而对畜禽产品质量安全提出更高的要求。出于治疗及预防疾病的

目的，喹诺酮类药物被广泛应用于现代畜禽养殖的一些环节中，但是药物的不合理

应用及不遵守正确的休药期导致药物在动物体内滞留或蓄积，并以残留的方式进入

人体，危害人类健康。如何进行药物残留的有效监控已经成为国际社会关注的焦点

问题，通过检测动物血液药物残留预测可食性组织中药物残留情况，将为药物的残

留监控提供更简便快捷的活体预测残留的方法［1-5］，对于药物的残留监控具有

重大理论和实际意义，也避免造成动物胴体的浪费。目前，文献报道的喹诺酮类药

物的检测方法，大多针对动物可食组织作为研究基质［6-10］，而将血液作为研

究基质的文献报道较少。由于动物可食组织基质复杂，导致样品前处理方法操作繁

琐，耗时较长，试剂需要量大，因此，选择相对简单的血液作为研究基质，由于其

基质简单，具有前处理方法简便、灵敏度高、重现性好等优点。

1材料与方法

1.1仪器与试剂

ACQUITYTM超高效液相色谱仪（美国Waters公司）；ABSciexQtrap5500

质谱仪（美国AB公司）；电子分析天平（德国赛多利斯公司）；旋涡混合仪

（上海沪西分析仪器厂有限公司）；强力振荡器（日本Taitec公司）；氮吹仪

（EYELA东京理化）；高速离心机（德国Hermle公司）。甲酸：优级纯。甲醇、

乙腈：色谱纯。标准品：依诺沙星、恩诺沙星、环丙沙星、沙拉沙星、达氟沙星、

诺氟沙星、氧氟沙星、噁喹酸、培氟沙星浓度均为100μg/mL，购自农业农村部

环境保护科研监测所；萘啶酸、氟甲喹、西诺沙星、D5-恩诺沙星纯度均大于

98.5%，购自德国Dr.Ehrenstorfer公司。

1.2样品制备

血液样品置于抗凝管中，在-18℃冰箱冷冻保存，取出放置室温后备用。

1.3样品前处理

准确吸取1mL血液样品，置于10mL离心管中，加入2mL0.1%甲酸乙腈溶液，

充分漩涡提取，10000r/min离心8min，上清液移入另一离心管中，再加入2

mL0.1%甲酸乙腈溶液重复提取一次，离心后合并上清液，将上清液于40℃水浴

中氮吹至近干，加入1mL甲醇—水（1∶4）溶液溶解，过0.22μm滤膜，待测。

1.4仪器条件

1.4.1色谱条件

色谱柱：WatersAcquityUPLCBEHC18柱（100mm×2.1mmi.d.，

1.7μm）；流速：0.2mL/min；柱温：40℃；进样体积：10μL；流动相：A相为

0.1%甲酸水溶液，B相为甲醇，梯度洗脱程序：0min，95%A；12min，10%

A；15min，10%A；16.1min，95%A；20min，95%A。

1.4.2质谱条件

电离方式：ESI+；喷雾电压（IS）：5000V；离子源温度（TEM）：500℃；雾

化气（GS1）流量：50mL/min；辅助加热气（GS2）流量：50mL/min；气帘

气（CUR）流量：25mL/min；碰撞气流量：6mL/min；去簇电压（DP）：80

V；入口电压（EP）：10V；检测模式：MRM。所测定的各化合物的保留时间

（RT）、母离子（Q1）、子离子（Q3）、碰撞能量（CE）及碰撞室出口电压

（CXP）见表1、图1。

2结果与讨论

2.1提取溶剂的选择

考查了甲醇、乙腈、乙酸乙酯3种提取溶剂的提取效果，结果显示乙腈作为提取

溶剂的回收率较高，高速离心后对血液的沉淀效果较好，因此，选择乙腈作为提取

溶剂，又考虑到喹诺酮类药物为碱性化合物，因此