气体成分分析高效液相色谱法.ppt

第64页,共79页，星期六，2024年，5月第65页,共79页，星期六，2024年，5月第66页,共79页，星期六，2024年，5月第67页,共79页，星期六，2024年，5月第68页,共79页，星期六，2024年，5月第69页,共79页，星期六，2024年，5月第70页,共79页，星期六，2024年，5月第71页,共79页，星期六，2024年，5月第72页,共79页，星期六，2024年，5月第73页,共79页，星期六，2024年，5月第74页,共79页，星期六，2024年，5月第75页,共79页，星期六，2024年，5月第76页,共79页，星期六，2024年，5月第77页,共79页，星期六，2024年，5月第78页,共79页，星期六，2024年，5月感谢大家观看第79页,共79页，星期六，2024年，5月（一）分配色谱原理基于样品分子在流动相和固定相间的溶解度不同键合固定相以化学键合将功能分子结合到惰性载体上。极性键合固定相键合在载体表面的功能分子极性基团的有机分子第32页,共79页，星期六，2024年，5月非极性键合固定相键合在载体表面的功能分子是非极性有机分子。正相HPLC由极性固定相和非极性流动相所组成的HPLC体系。反相HPLC非极性固定相和极性流动相所组成的液相色谱体系第33页,共79页，星期六，2024年，5月（二）凝胶色谱（gelchromatography）以多孔性物质作固定相，样品分子受固定相孔径大小的影响而达到分离的分离模式。样品分子与固定相之间不存在相互作用力（吸附、分配和离子交换等）。比固定相孔径大的溶质分子不能进入孔内，迅速流出色谱柱，不能被分离。比固定相孔径小的分子进入孔内而产生保留，溶质分子体积越小，进入固定相孔内的机率越大，停留（保留）的时间也就越长图8-12原理第34页,共79页，星期六，2024年，5月◆固定相：化学惰性的多孔性材料，如聚苯乙烯凝胶、亲水凝胶、无机多孔材料。◆流动相：在凝胶色谱中，流动相的作用不是为了控制分离，而是为了溶解样品或减小流动相粘度。◆凝胶过滤色谱（gelfiltrationchromatography,GFC）：以水或缓冲溶液作流动相的凝胶色谱法。主要适合于水溶性高分子的分离。◆凝胶渗透色谱（gelpermeationchromatography,GPC）：以有机溶剂作流动相的凝胶色谱法。主要适合于脂溶性高分子的分离。如甲苯和四氢呋喃能很好地溶解合成高分子，所以GPC主要用于合成高分子的分子量（分布）的测定。第35页,共79页，星期六，2024年，5月（三）离子色谱（ionchromatography,IC）

IEC使用的是低交换容量的离子交换剂，这种交换剂的表面有离子交换基团。带负电荷的交换基团（如磺酸基和羧酸基）可以用于阳离子的分离，带正电荷的交换基团可以用于阴离子的分离。图8-131离子交换色谱法第36页,共79页，星期六，2024年，5月

ICE的分离机理是以树脂的Donnan排斥为基础的分配过程。分离阴离子用强酸性高交换容量的阳离子交换树脂，分离阳离子用强碱性高交换容量的阴离子交换树脂。图8-142离子排斥色谱法第37页,共79页，星期六，2024年，5月

离子对色谱(IPC)也称离子相互作用色谱，是在流动相中加入适当的具有与被测离子相反电荷的离子，即离子对试剂，使之与被测离子形成中性的离子对化合物，此离子对化合物在反相色谱柱上被保留。保留的大小主要取决于离子对化合物的解离平衡常数和离子对试剂的浓度。离子对色谱也可采用正相色谱的模式，即可以用硅胶柱，但不如反相色谱效果好，多数情况下采用反相色谱模式，所以也常称反相离子对色谱。3离子对色谱法第38页,共79页，星期六，2024年，5月检测器液相色谱检测技术第39页,共79页，星期六，2024年，5月第40页,共79页，星期六，2024年，5月原理：基于Lambert-Beer定律，即被测组分对紫外光或可见光具有吸收，且吸收强度与组分浓度成正比。

很多有机分子都具紫外或可见光吸收基团，有较强的紫外或可见光吸收能力，因此UV-VIS检测器既有较高的灵敏度，也有很广泛的应用范围。由于其对环境温度、流速、流动相组成等的变化不是很敏感，所以还能用于梯度淋洗。

紫外-可见光检测器第41页,共79页，星期六，2024年，5月用UV-VIS检测时，为了得到高的灵敏