岛津Essentia LC-15C高效液相色谱仪标准操作规程 .pdfVIP

1目的

规范岛津LC-15C型高效液相色谱仪的操作。

2范围

适用于岛津LC-15C高效液相色谱仪的使用。

3责任

分析人员负责本规程的实施。

4内容

4.1系统组成

本系统由一个LC-15C溶剂输送泵、DGU-20A在线脱气机、SPD-15C紫外可见

3

光双波长检测器、CTO-15C柱温箱/储液盒、7725i手动进样阀和Labsolutions15C

色谱数据工作站组成。

4.2开机前准备

4.2.1配制所需的流动相，经0.45um微孔滤膜过滤，超声3～5min。

4.2.2根据待检样品的需要选择合适的色谱柱和定量环。

4.2.3配制对照品溶液和样品溶液（也可在平衡系统时配制），经0.22um微孔滤

膜过滤。

4.2.4清洗进样阀：先用纯化水，再用甲醇或乙腈清洗（来回转动进样阀），最后

进样阀停留在“Load”位置。

4.3开机

4.3.1打开计算机，进入windows系统。打开色谱仪各模块的电源开关，待自检

完成后，双击Labsolutions15C在线色谱工作站，输入用户名和密码，进入【LC

实时分析】窗口。

4.3.2检查分析仪器，单击助手栏中的【系统检查】图标，设置要检查的项，确

保没有任何仪器故障，并在【LC实时分析】窗口的状态栏显示为“就绪”。

4.3.3轻轻旋开冲洗阀（逆时针约一圈），按【purge】键，pump指示灯亮，泵开

始进行冲洗，冲洗结束后，将冲洗阀顺时针旋紧。如气管中仍有气泡则重复以上

操作直至气泡排尽。按【pump】启动泵。

4.3.4建立新方法文件

4.3.4.1选择“文件-新建方法文件”，在【仪器参数视图】中设置仪器参数，如

运行时间、流速、检测波长、洗脱模式等，确保为每一个检测器设置“LC停止

时间”和“结束时间”，并应用到所有采集时间。参数设置完毕后，单击“下载”

将方法传输到仪器，且仪器将按照新的参数开始运行；选择“文件-保存方法”，

保存方法。

4.3.4.2通过在线改变数据采集或者在线/离线改变数据分析参数而变更方法，选

择“方法-方法另存为”，输入新的方法名称，保存方法。

4.3.4.3若新方法已建立，则选择“文件-打开方法文件”，调出所需方法文件，

单击“下载”，即可运行。

4.4单针进样

4.4.1待【色谱图视图】中的基线漂移稳定后，单击【数据采集】中的“单次运

行”图标，出现【单次运行】窗口，编辑样品信息、分析方法名、输入创建数据

文件的名称等，输入完毕后点击确定，等待进样。

4.4.2使用平头针进样，进样方式采用完全装液法，进样量最少为定量环体积的

3～5倍。

4.4.3进样前，先用样品溶液冲洗进样阀；在“Load”位置，进样，将进样阀转

到“Inject”位置，工作站自动采集数据，状态栏显示“正在运行”。

4.5数据分析

4.5.1双击Labsolutions15C在线色谱工作站，启动“再解析”，在助手栏选择【LC

数据分析】，打开文件夹，选择所需的数据名称，调出数据文件。

4.5.2点击“向导”，设置斜率、漂移等参数，进行积分。

4.6打印报告

4.6.1点击“报告格式”，建立报告模板包括样品信息、色谱图等。

4.6.2打开文件夹，选定需要打印的数据文件并拖至模板中，预览确定后再点击

“打印”即可。

4.7关机

4.7.1样品测定完毕后，依次用10%甲醇溶液、90%甲醇溶液冲洗系统和色谱柱

各30min（若流动相不含缓冲盐，可直接冲洗90%甲醇溶液），色谱柱保最后保

存在90%甲醇溶液中。冲洗完毕后，退出色谱工作站，关闭仪器各模块电源。

4.7.2为防止缓冲盐和其它残留物留在进样系统中，通常用不含盐的稀释剂、水

或不含盐的流动相在进样阀的Load和Inject位置反复冲洗。

4.7.3关闭电脑，填写《仪器使用记录》。

4.8注意事项

4.8.1进样时要保证针插到位，用手指轻轻护住进样针前端玻璃，以免注射过程

中由于后端有所摇动而使针头在管路中受力。

4.8.2进样时要带针，如果先拔针再扳阀，就不能保证定量环中液体完全被流动

相冲走；进样后要拔针，如果不拔针，由于受重力影响会使针变弯。

4.8.3手柄处于Load和Inject之间，由于暂时堵住流路，流路中压力骤增，再转

到进样位，过高的压力在柱头上引起损坏，所以应尽快转动阀，不能停留在中途。

进样后拔针，及时扳回阀，最多停留十秒左右即可。

4.8.