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猪繁殖与呼吸综合征病毒转录调控机制研究的开题报告

标题：猪繁殖与呼吸综合征病毒转录调控机制研究

研究背景和意义：

猪繁殖与呼吸综合征病毒（PorcineReproductiveandRespiratorySyndrome

Virus，PRRSV）是一种造成猪医学上重要疾病的病毒，其主要特点是严重影响了猪价

值链的发展，导致了严重的经济损失。PRRSV的生物学特性和致病机制，以及病毒-宿

主相互作用机制研究一直是当前研究的热点和难点，其对于控制和预防PRRS疾病具

有重要的理论和应用价值。

研究内容和目标：

本研究项目通过综合运用定量PCR、免疫印迹、RNA测序和生物信息学分析等手

段，重点研究PRRSV的转录调控机制，从而深入探究PRRSV感染过程中的宿主细胞

反应和病毒感染逃逸机制。旨在揭示PRRSV与宿主细胞相互作用的分子机制，为进一

步阐明PRRSV的致病机理、防制和治疗提供重要的基础理论支撑。

研究方法和流程：

1.构建PRRSV-AY病毒株感染PAMs、Marc-145和CHO等不同细胞系。

2.系统研究不同细胞系PRRSV感染蛋白表达、细胞凋亡等基本生物学特性，并

利用RNA测序技术进行以侵染后3、6、12、24小时为时间点的转录组测序。

3.利用生物信息学和统计学分析转录组测序数据，筛选出差异表达基因，利用

KEGG等通路富集分析揭示PRRSV感染过程中的重要信号通路。

4.利用免疫印迹、定量PCR等方法检测有代表性的转录组富集通路成员的表达

水平，分析其受PRRSV感染影响的具体机制。

5.通过CRISPR/Cas9基因编辑技术，对感染过程中的典型基因敲除，验证其对

PRRSV感染逃逸和宿主细胞免疫反应的影响。

预期结果：

通过对PRRSV的转录调控机制进行深入研究，揭示病毒感染和宿主反应的分子

机制，为进一步阐明PRRSV的致病机理和防治提供新的理论和应用基础。同时，本研

究也具有一定的参考价值，可为其他病毒的研究提供方法借鉴和理论支持。