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兽用化学药物临床药代动力学试验指导原则

一、概述

（一）定义与目的

新兽药的临床药代动力学是研究药物在靶动物体内的吸收、分布、代谢和排

泄的规律，对药物在动物体内随时间变化而发生的量变规律进行测定，其目的是

通过试验获取新兽药在靶动物的药动学参数。药动学参数是评价兽药质量的重要

指标之一，是药物制剂学研究的主要依据和工具，也是制定合理的给药方案（包

括剂量、疗程、给药途径、给药间隔等）的重要理论和实践依据。

（二）适用范围

本指导原则适用于兽用化学药物在靶动物进行临床药代动力学研究。各试验

单位可根据不同药品的特点，参考本技术指导原则，科学合理地进行试验设计，

并对试验结果进行综合评价。

二、分析方法

由于生物样品一般来自全血、血清、血浆、尿液或其他组织，具有取样量少、

药物浓度低、内源性物质的干扰多（如激素、维生素、胆汁以及可能同服的其他

药物）以及个体差异大等特点，因此必须建立灵敏、专一、精确、可靠的生物样

品定量分析方法，并对方法进行确证。

（一）常用分析方法

目前常用的分析方法主要有：

1.色谱法：气相色谱法(GC)、高效液相色谱法(HPLC)、色谱－质谱联用法

（LC-MS、LC-MS-MS，GC-MS，GC-MS-MS）等，可用于大多数药物的检测。

从目前发展看，生物样品的分析一般首选色谱法，如HPLC、GC法或LC-MS、

GC-MS法，这类方法灵敏度、特异性、准确性一般都能适应临床药代动力学研

究的需要，大约90%的药物浓度测定可以用色谱法来完成。具体选用何种分析方

法应根据药物的化学结构、理化性质、仪器条件以及借鉴文献方法多方面因素来

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考虑确定。

2.免疫学方法：放射免疫分析法、酶免疫分析法、荧光免疫分析法等，多用

于蛋白质多肽类物质的检测。

3.微生物学方法：主要用于抗生素或部分抗寄生虫药的检测，如果抗微生物

药的代谢产物仍有抗菌活性的，则不宜选用微生物法。

（二）方法学确证

生物样品测定的关键是方法学的确证。方法学确证是整个药代动力学研究的

基础。这是药代动力学研究有别于其它药理毒理研究的特殊之处。所有药代动力

学研究结果，都依赖于生物样品的测定，只有可靠的方法才能得出可靠的结果。

在通过特异性、灵敏度、精密度、准确度、稳定性等研究建立了检测方法，得到

了标准曲线后，在检测过程中还应进行方法学质控，制备随行标准曲线并对质控

样品进行测定，以确保检测方法的可靠性。建立可靠的和可重复的定量分析方法

是进行临床药代动力学研究的关键之一。为了保证分析方法可靠，必须对方法进

行充分验证，一般应进行以下几方面的考察。

1.特异性指在样品中存在干扰成分的情况下，分析方法能够准确、专一地

测定分析物的能力。必须证明所测定物质是受试药品的原形药物或特定活性代谢

物，生物样品所含内源性物质和相应代谢物、降解产物不得干扰对样品的测定，

如果有几个分析物，应保证每一个分析物都不被干扰。应确定保证分析方法的最

佳检测条件。对于色谱法至少要考察6个不同来源空白生物样品色谱图、空白生

物样品外加对照物质色谱图（注明浓度）及用药后的生物样品色谱图。采用

LC-MS、LC-MS/MS法时应注意考察分析过程中的介质效应。

2.标准曲线和定量范围标准曲线反映了所测定物质浓度与仪器响应值之

间的关系，一般用回归分析法（如用加权最小二乘法等）所得的回归方程来评价。

应提供标准曲线的线性方程和相关系数，说明其线性相关程度。标准曲线高低浓

度范围为定量范围，在定量范围内浓度测定结果应达到试验要求的精密度和准确

度。

配制标准样品应使用与待测样品相同的生物介质。不同的样品应制备各自的

标准曲线。用于建立标准曲线的标准浓度个数取决于分析物可能的浓度范围和分

析物/响应值关系的性质。必须至少用6个浓度建立标准曲线，对于非线性相关可

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能需要更多浓度点。定量范围要能覆盖全部待测的生物样品浓度范围，不得用定