兔子骨髓取材 .pdfVIP

第一次是1周前，把兔子（2.57kg）关在兔笼里，左侧卧位，剪刀尽量把毛剪掉，PVP消毒整个腰部臀部，

助手抓住双脚，穿刺点取脊柱右边骨性突出部位（髂后棘），利多卡因局部麻醉至骨膜，左手拇指食指拎起

皮肤，右手先将12号穿刺针穿过皮肤，再在左手触摸下找骨性突出部位，垂直脊柱穿刺，开始有接触骨面

的粗糙感，后来穿刺过程中突破感强烈，穿刺针固定牢靠，用预先肝素湿润的20ml针筒一次即顺利抽出

5ml骨髓，呈深暗红色，较稠，与外周血比较明显不同。带到实验室经ficoll离心取单核细胞层接种培养后

有细胞贴壁生长。

第二次就是今天，同一只兔子，采用乌拉坦1g/kg，耳缘静脉注射全身麻醉，麻醉效果很差，穿刺过程中

兔子挣扎剧烈，增加0.5g后仍需要助手抓住双脚。然后悲剧的事情发生了，先是穿刺右坐骨结节，操作步

骤同1周前，每次穿入有突破感后，用预先肝素湿润的10ml针筒抽吸，只能抽出0.1ml左右深暗红色液

体，在髂后脊上下穿刺5、6次后只抽出1ml骨髓。浑身都在冒汗，于是决定根据文献记录，从股骨大转

子沿股骨方向穿刺取骨髓。仍然用左手食指中指摸到骨性标志，拎起局部皮肤先将穿刺针刺入皮下，再摸

到穿刺点，沿股骨方向穿刺，有突破感后接针筒反复抽吸有时是干抽，最终抽出2ml左右骨髓。继续冒汗，

随即出现了文献中没有记载的方法，将兔子俯卧位，在助手帮助下用剪刀在左髂后棘部位皮肤上作1cm切

口，逐层剪开组织直至暴露白乎乎的髂后棘，定位明确后用骨穿针穿刺，顺利抽出2ml骨髓后兔子突然纵

声“嗷嗷”大叫，我和助手对视5秒钟，本来还想研究下穿刺的问题，只好决定今天停止这惨绝人寰的暴行，

将切口缝合肌注40WU青霉素后带着寒碜的5ml骨髓撤退。

我分析今天穿刺不顺利的因素如下：

1、穿刺针有突破感，但并未真正在骨髓腔内，可能太用力穿到对面骨质中去，应该慢慢退针多次试抽，也

可能方向完全不对没有进入骨髓腔，应改变方向再次穿刺；

2、要么局麻，要么全麻+局麻，反正乌拉坦效果不佳，或者药物过期了（已经放了1个月了），也可以重

新配点来再试试。

我心中的疑惑如下：

1、我的穿刺方法到底对不对？

2、第一次穿刺髂骨即轻松取出5ml骨髓是否正常？

3、一般髂骨里骨髓最多能抽出多少？

4、一般穿刺股骨取骨髓是像我那样弄的吗？文献里说穿刺股骨取出1-2ml骨髓，但是如果我使劲抽最多能

抽出多少？

5、有没有取兔子骨髓的高手指导一下？给我一份详细一点的指南，最好有图谱，万分感谢！

一、实验动物的处死

实验动物的处死方法很多，应根据动物实验目的、实验动物品种（品系）、以及需要采集标

本的部位等因素，选择不同的处死方法。无论采用哪一种方法，都应遵循安乐死的原则。

安乐死是指在不影响动物实验结果的前提下，使实验动物短时间无痛苦地死亡。处死实验动

物时应注意，首先要保证实验人员的安全；其次要确认实验动物已经死亡，通过对呼吸、

心跳、瞳孔、神经反射等指征的观察，对死亡作出综合判断；再者要注意环保，避免污染环

境，还要妥善处理好尸体。

1、颈椎脱臼处死法

此法是将实验动物的颈椎脱臼，断离脊髓致死，为大、小鼠最常用的处死方法。操作时实验

人员用右手抓住鼠尾根部并将其提起，放在鼠笼盖或其他粗糙面上，用左手拇指、食指用

力向下按压鼠头及颈部，右手抓住鼠尾根部用力拉向后上方，造成颈椎脱臼，脊髓与脑干断

离，实验动物立即死亡。

2、断头处死法

此法适用于鼠类等较小的实验动物。操作时，实验人员用左手按住实验动物的背部，拇指夹

住实验动物右腋窝，食指和中指夹住左前肢，右手用剪刀在鼠颈部垂直将鼠头剪断，使实验

动物因脑脊髓断离且大量出血死亡。

3、击打头盖骨处死法

主要用于豚鼠和兔的处死。操作时抓住实验动物尾部并提起，用木锤等硬物猛烈打击实验动

物头部，使大脑中枢遭到破坏，实验动物痉挛并死亡。

4、放血处死法

此法适用于各种实验动物。具体做法是将实验动物的股动脉、颈动脉、腹主动脉剪断或剪破、

刺穿实验动物的心脏放血，导致急性大出血、休克、死亡。

犬、猴等大动物应在轻度麻醉状态下，在股三角做横切口，将股动脉、股静脉全部

暴露并切断，让血液流出。操作时用自来水不断冲洗切口及血液，既可保持血液畅流无阻，

又可保持操作台清洁，使实验动物急性大出血死亡。

5、空气栓塞处死法

处死兔、猫、犬常用此法。向实验动物静脉内注入一定量的空气，形成肺动脉或冠状动脉空

气栓塞，或导致心腔内充满气泡，心脏收缩时气泡变小，心脏舒张时气泡变大，从而影响

回心血液量和心输出量，引起循环障碍、休克、死亡。空气