常见缓冲溶液配制.pdf

实验室常用缓冲液配置方案

1)1MTris-HCl(pH7.4,7.6,8.0)

组份浓度：1MTris-HCl

配制量：1L

配制方法：

1.称量121.1gTris置于1L烧杯中。

2.加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解。

3.按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。

PH值浓HCl

7.4约70ml

7.6约60ml

8.0约42ml

4.将溶液定容至1L。

5.高温高压灭菌后，室温保存。

注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，

温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。

2)10×TEBuffer(pH7.4,7.6,8.0)

组份浓度：100mMTris-HCl,10mMEDTA

配制量：1L

配制方法：

1.量取下列溶液，置于1L烧杯中。

1MTris－HClBuffer（PH7.4，7.6，8.0）100ml

500mMEDTA(PH8.0)20ml

2.向烧杯中加入约800ml的去离子水，均匀混合。

3.将溶液定容至1L后，高温高压灭菌。

4.室温保存。

3)1.5MTris-HCl(pH8.8)

组份浓度：1.5MTris-HCl

配制量：1L

配制方法：

1.称量181.7gTris置于1L烧杯中。

2.加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解。

3.用浓盐酸调节pH值至8.8。

4.将溶液定容至1L。

5.高温高压灭菌后，室温保存。

注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，

温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。

4)3M醋酸钠(pH5.2)

组份浓度：3M醋酸钠

配制量：100ml

配制方法：

1.称量40.8gNaAc·3H2O（或者24.6g无水NaAc）置于100-200ml烧杯中，加入月40ml的

去离子水搅拌溶解

2.加入冰醋酸调节pH值至5.2

3.加去离子水将溶液定容至100ml

4高温高压灭菌后，室温保存。

5)PBSBuffer

组份浓度：137mMNaCl,2.7mMKCl,10mMNa2HPO4,2mMKH2PO4

配制量：1L

配制方法：

1.称量下列试剂，置于1L烧杯中。

NaCl8g

KCl0.2g

Na2HPO41.42g

KH2PO40.27g

2.向烧杯中加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解。

3.滴加浓盐酸将pH值调节至7.4，然后加入去离子水将溶液定容至1L。

4.高温高压灭菌后，室温保存。

注意：上述PBSBuffer中无二价阳离子，如需要，可在配方中补充1mMCaCl2和0.5mM

MgCl2。

6)10M醋酸铵

组份浓度：10M醋酸铵

配制量：100ml

配制方法：

1.称量77.1g醋酸铵置于100～200ml烧杯中，加入约30ml的去离子水搅拌溶解。

2.加去离子水将溶液定容至100ml。

3.使用0.22mm滤膜过滤除菌。

4.密封瓶口于室温保存。

注意：醋酸铵受热易分解，所以不能高温高压灭菌。

7)苯酚/氯仿/异戊醇(25:24:1)

配制方法：

1.说明：从核酸样品中除去蛋白质时常常使用苯酚/氯仿/异戊醇（25:24:1)。氯仿可使蛋

白质变性并有助于液相与有机相的分离，而异戊醇则有助于消除抽提过程中出现的气泡。

2.配制方法：将Tris-HCl平衡苯酚与等体积的氯仿/异戊醇（24:1）混合均匀后，移入棕色

玻璃瓶中4℃保存。

8）10％(W/V)SDS

组份浓度：10％(W/V)SDS

配制量：100ml

配制方法：

1.称量10g高纯度的SDS置于100-200ml烧杯中，加入约80ml的去离子水，68℃加入溶解

2.滴加浓盐酸调节pH值至7.2

3.将溶液定容至100ml后，室温保存。

9）2NNaOH

组份浓