Waters 600-2998 高效液相色谱系统操作规程 .pdf

Waters600-2998高效液相色谱系统操作规程

1.目的

规范Waters高效液相色谱系统的使用和维护。

2.范围

本规程适用于Waters高效液相色谱系统的使用和维护。

3.职责

质检室仪器分析员负责Waters高效液相色谱系统的日常使用和维护。

4.系统组成

本系统由Waters600多溶剂输送系统（有梯度控制器的高压输液泵）、Walers在线脱气

机、

Rheodyne7725i手动进样阀、Waters2998紫外检测器、Empower色谱工作站/电脑等组成，

另外还包括打印机等辅助设备。

5.程序

5.1.准备

5.1.1.使用前应根据待检样品的检验方法准备所需的流动相（应足够；流动相必须用0.45用

「

滤膜过滤）、样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制），更换合适的色谱柱（柱进出口位

置

应与流动相流向一致）和定量环。

5.1.2.通电前应检查仪器设备之间的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。

5.2.开机和泵操作

5.2.1.开机

5.2.1.1.接通电源，依次打开脱气机、60（）泵、2998检测器，待检测器自检结束显示测量

状

态时，打开打印机、电脑显示器、主机。

5.2.1.2.打开Empower软件，出现Empower登录窗口，输入用户名system和密码manager,

进入EmpowerPro窗口。在“浏览项目内选择所需的项目，“运行样品”内选择系统

Waters-600-7725-2998进入运行样品窗口。

5.2.2.更换溶剂

522.1.打开600E泵后，转动进口集合管阀手柄（以下简称手柄）至RUN位置；

5.2.22将一塑料烧杯放在参照阀出口管下以收集分流的溶剂，向右打开参照阀（断开柱和

进样器）；

5.223.按［Direct］键使其显示直接控制屏幕，设流速为Iml/min（梯度配比阀在0ml/min

时不工作）；

522.4.选择欲使用的某一溶剂通道，设其比例为100%,其它为0%；

5.225.将输液管从原有溶剂瓶中取出，放入一干净的空瓶中；

5.2.26逆时钟转动手柄至DRAW位置，用启动注射器从进口集合管阀的接口抽出约2ml

溶剂;

5.227.再将输液管放入新溶剂瓶内，继续抽吸直到新溶剂出来并无气泡为止；

522.8.转动手柄至RUN位置，将启动注射器取下并排掉筒内的溶剂。

5.229.重复522.4.〜522.8.直至所有即将使用的溶剂更换完毕。

5.2.3.排气泡

5.2.3.1.打开参照阀，换流动相为（甲醇：超纯水=1：9）,设流速为7ml/min（注意：确认

参照阀是打开的，否则可能损坏安装好的柱）；

1.1.32转动进口集合管阀手柄至DRAW位置，用启动注射器抽出约10ml水；

5.233.顺时钟转动手柄至INJ位置，缓慢用力使水通过泵头从参照阀出口管排出（注意不

要将气泡注入泵中）；

5.234.按［Stopflow］屏幕键停泵，关上参照阀。

5.235.如按以上方法不能排尽气泡，从柱入口处拆下泵出口管，用塑料管连接至塑料烧杯

中，设流速为10ml/min,冲洗2〜5min（或更长时间）后停泵，重新接上柱。

53平衡系统（分两种情况进行）

5.3.1.等度模式

5.3.1.1.每次以O.lml/min的增量加大流速至1ml/min,以甲醇:超纯水=1：9冲洗系统

10min

o

5.3.1.2.检查管路连接、柱接口及泵头处是否漏液，如漏液应予以排除。

5.3.1.3.观察泵控制屏幕上的压力值，压力波动应在平均值的5〜10%以内。如超出此范

围，

可初步判断为柱前管路仍有气泡，重复5.2.3.下的步骤。

5.3.1.4.波动平稳后，换检验方法规定的流动相比例冲洗系统。在检查基线稳定性

前，

让最少5〜6倍柱体积的流动相通过系统。

5.3.1.5.在“运行样品”窗口下的“方法组”档内选择所需的方法组，按“监视器”（此后

泵由软

件控制），观察基线和压力变化。如果冲洗至基线漂移＜l（PAu/min,噪声为10«Au数量

级，

且压力平稳时，可认为系统已达到平衡状态，可以进样。

531.6.按“中断”红色图标（左上第五个），停止监视基线。

5.3.2.梯度模式

5.3.2.1.按检验方法规定的条件冲洗平衡系统，并注意压力波动变化和排气泡。

5.3.22在进样前运行1〜2次空白梯度。

5.4.