（三年模拟精选）高考生物 第十一单元 专题二十七 胚胎工程与生态工程（全国通用）.docVIP

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【大高考】（三年模拟精选）2016届高考生物第十一单元专题二十七胚胎工程与生态工程（全国通用）

A组基础巩固

1.(2015·江西九江七市第一次联考)在畜牧生产中，人们利用多种方法促进优良畜群的繁育，取得了显著成效。请就高产奶牛的快速繁育过程回答以下问题：

(1)克隆奶牛：从供体高产奶牛体内获得体细胞后，对其进行的初次培养称为________________，培养的细胞在贴壁生长至充满培养皿底时停止分裂，这种现象称为________________，一般选取传代________代以内的细胞(细胞核)注入体外培养到________期的受体去核卵母细胞内，通过________________使两细胞融合，构建重组胚胎，在体外培养并移入代孕母牛体内，从而获得与供体奶牛遗传物质基本相同的犊牛。

(2)试管牛：将体外培养成熟的卵母细胞与经________________法获能的精子在体外受精后，移入______________中继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力。通常将胚胎培养至________期，取________细胞做DNA分析性别鉴定，并将雌性胚胎移入________________的其他雌性动物的体内，使之继续发育为新个体。

解析(1)克隆奶牛：从供体高产奶牛体内获得体细胞后，对其进行的初次培养称为原代培养；培养的细胞在贴壁成长至充满培养皿底时停止分裂，这种现象称为接触抑制；由于10代以内的细胞能保持正常的二倍体核型，减数第二次分裂中期的卵母细胞才具有受精的能力，因此一般选取传代10代以内的细胞(细胞核)注入体外培养到减数第二次分裂中期的受体去核卵母细胞内，通过电刺激使两细胞融合，构建重组胚胎，在体外培养并移入代孕母牛体内，从而获得与供体奶牛遗传物质基本相同的犊牛。

(2)试管牛：将体外培养成熟的卵母细胞与经化学诱导法获能的精子在体外受精后，移入发育培养液中继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力。通常将胚胎培养至囊胚期，取滋养层细胞做DNA分析性别鉴定，并将雌性胚胎移入同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内，使之继续发育为新个体

答案(1)原代培养接触抑制10MⅡ中电刺激

(2)化学诱导发育培养液囊胚滋养层同种的、生理状态相同

2.(2014·江西景德镇二模)下面是将目的基因导入动物细胞，培育转基因动物的常用操作程序。根据图示过程和所学知识，将下面操作程序补充完整。

(1)构建基因表达载体：在构建基因表达载体时常要用到工具酶。常用的DNA连接酶有________和________，后者可以用于平末端的连接。如果目的基因要在乳腺细胞中表达，基因表达载体构建时要将目的基因与________的启动子、标记基因和终止子等组件重组在一起，载体一般要有一至多个限制酶切割位点便于________。

(2)获得足够数量的受精卵：为了获得足够数量的受精卵，先利用促性腺激素刺激雌性鼠超数排卵，然后从________冲取________，________(需要，不需要)体外培养，之后用于完成体外受精。

(3)将目的基因导入细胞：确定目的基因是否整合到染色体上，一般需用___________________________做探针，与转基因小鼠细胞中提取的________进行DNA分子杂交。

(4)早期胚胎培养：早期胚胎培养的培养液成分一般比较复杂，除一些无机盐和有机盐外，还需要添加__________、________、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及动物血清等物质。当胚胎培养到适宜的阶段，可进行胚胎移植。

(5)胚胎移植：在胚胎移植前要对接受胚胎的受体进行______处理。移植后，还要对受体雌鼠进行______检查。

(6)胚胎干细胞形态具有______________的特性，它在添加______________的培养液中可以维持不分化的状态。

解析(1)进行基因工程相关操作常用的DNA连接酶有E·coliDNA连接酶与T4DNA连接酶，其中T4DNA连接酶能连接黏性末端和平末端；若目的基因在乳腺细胞中表达，则构建基因表达载体时，宜将目的基因与乳腺蛋白基因的启动子、标记基因及终止子等组件重组；载体中限制酶切割位点便于切开缺口，插入目的基因。(2)经促性腺激素处理后，可从该动物输卵管中冲取卵母细胞直接用于体外受精。(3)确认目的基因一般用放射性同位素或荧光分子标记的目的基因作探针与从受体细胞中提取的基因组DNA杂交，依据是否出现杂交带确认结果，推出结论。(4)早期胚胎培养液成分包括两盐、两素(激素、维生素)及血清。(5)胚胎移植前需对受体进行同期发情处理；移植后，要对受体雌鼠进行是否妊娠检查。(6)胚胎干细胞形态上具有体积小，细胞核大，核仁明显等特征，它在添加抑制因子的培养液中可维持不分化状态